雞免疫球蛋白M(IgM)酶聯免疫分析

試劑盒使用說明書

本試劑盒僅供研究使用。

檢測范圍：                                                          96T

10ng/ml - 320ng/ml

使用目的：

本試劑盒用于測定雞血清、血漿及相關液體樣本中免疫球蛋白M(IgM)含量。

實驗原理

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中雞免疫球蛋白M(IgM)水平。用純化的雞免疫球蛋白M(IgM)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入免疫球蛋白M(IgM)，再與HRP標記的免疫球蛋白M(IgM)抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的免疫球蛋白M(IgM)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中雞免疫球蛋白M(IgM)濃度。

試劑盒組成

1

30倍濃縮洗滌液

20ml×1瓶

7

終止液

6ml×1瓶

2

酶標試劑

6ml×1瓶

8

標準品（640ng/ml）

0.5ml×1瓶

3

酶標包被板

12孔×8條

9

標準品稀釋液

1.5ml×1瓶

4

樣品稀釋液

6ml×1瓶

10

說明書

1份

5

顯色劑A液

6ml×1瓶

11

封板膜

2張

6

顯色劑B液

6ml×1/瓶

12

密封袋

1個

標本要求

1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融

2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

操作步驟

標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

320ng/ml

5號標準品

150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液

160ng/ml

4號標準品

150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液

80ng/ml

3號標準品

150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液

40ng/ml

2號標準品

150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液

20ng/ml

1號標準品

150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液

加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。  
配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
溫育：操作同3。
洗滌：操作同5。
顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

操作程序總結：

計算

  以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。

注意事項

1．試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。

3．各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。

請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以總稀釋倍數（×n×5）。
封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物請避光保存。

7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9．本試劑不同批號組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。

保存條件及有效期

1．試劑盒保存：；2-8℃。

2．有效期：6個月

小鼠白介素23(IL-23)ELISA試劑盒
小鼠心肌營養素1(CT-1)ELISA試劑盒
小鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)ELISA試劑盒
小鼠脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒
小鼠大內皮素(Big ET)ELISA試劑盒
小鼠凝血因子Ⅷ相關抗原(FⅧ-Ag)ELISA試劑盒
小鼠凝血因子Ⅸ(FⅨ)ELISA試劑盒
小鼠凝血因子Ⅹ(FⅩ)ELISA試劑盒
小鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(vWF)ELISA試劑盒
小鼠前心鈉肽(Pro-ANP)ELISA試劑盒
小鼠N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA試劑盒
小鼠纖溶酶抗纖溶酶復合物(PAP)ELISA試劑盒
小鼠凝血酶抗凝血酶復合物(TAT)ELISA試劑盒
小鼠抗凝血酶受體(ATR)ELISA試劑盒
小鼠凝血酶受體(TR)ELISA試劑盒
小鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA試劑盒
小鼠磷酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA試劑盒
小鼠β內啡肽(β-EP)ELISA試劑盒
小鼠缺血修飾白蛋白(IMA)ELISA試劑盒
小鼠蛋白激酶B(PKB)ELISA試劑盒
小鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISA試劑盒
小鼠血紅素氧合酶2(HO-2)ELISA試劑盒
小鼠骨膠原交聯(Cr)ELISA試劑盒
小鼠促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒
小鼠Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISA試劑盒
小鼠脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉(DPD)ELISA試劑盒
小鼠吡啶交聯物(PY)ELISA試劑盒
小鼠骨橋素(OPN)ELISA試劑盒
小鼠促腎上腺皮質激素(ACTH)ELISA試劑盒
小鼠骨特異性堿性磷酸酶B(ALP-B)ELISA試劑盒
小鼠轉鐵蛋白受體(TFR/CD71)ELISA試劑盒
小鼠半胱氨酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA試劑盒
小鼠第八因子相關抗原(FⅧAg)ELISA試劑盒
小鼠丙酮酸激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA試劑盒
小鼠催乳素(PRL)ELISA試劑盒
小鼠抵抗素(Resistin)ELISA試劑盒
小鼠乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA試劑盒
小鼠骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒
小鼠γ氨基丁酸(GABA)ELISA試劑盒
小鼠5羥色胺(5-HT)ELISA試劑盒
小鼠P物質受體(SP-R)ELISA試劑盒
小鼠P物質(SP)ELISA試劑盒
小鼠血管活性腸肽(VIP)ELISA試劑盒
小鼠甲狀腺過氧化物酶(TPO)ELISA試劑盒
小鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)ELISA試劑盒
小鼠血管舒緩激肽(BK)ELISA試劑盒
小鼠胰島素原(PI)ELISA試劑盒
小鼠抗IgE受體抗體ELISA試劑盒
小鼠抗IVIgG抗體ELISA試劑盒
小鼠抗心肌抗體(AMA)ELISA試劑盒
小鼠銅藍蛋白(CP/CER)ELISA試劑盒
小鼠p53(p53)ELISA試劑盒
小鼠環磷酸鳥苷(cGMP)ELISA試劑盒
小鼠一氧化氮合成酶(NOS)ELISA試劑盒
小鼠誘導型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA試劑盒
小鼠內皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA試劑盒
小鼠組胺(HIS)ELISA試劑盒
小鼠脂蛋白相關磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒
小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒
小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒
小鼠脂聯素(ADP)ELISA試劑盒
小鼠熱休克蛋白40(Hsp-40)ELISA試劑盒
小鼠β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒
小鼠白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒
小鼠細胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA試劑盒