(一)操作室厭氧環(huán)境形成
1)按使用要求放置好必要的配件和器具,并向操作室內(nèi)放入兩個(gè)五毒塑料袋。
2)混合氣瓶、氮?dú)馄枯斎雺毫φ{(diào)整,調(diào)節(jié)減壓閥,使輸入壓力為0.1Mpa
3)打開設(shè)備后配,電源開關(guān)后,按控制牌上的總電源鍵,使設(shè)備通電。
4)操作室放入1000g鈀粒(密封)和500g干燥劑,并放入美蘭指示條。
5)關(guān)緊取樣室內(nèi)外門,并抽真空校驗(yàn)。(按控制面牌上真空泵鍵,按一下開,再按一下關(guān))
6)操作室內(nèi)*次置換(氮?dú)庵脫Q):
(1)先用橡皮管插入操作室內(nèi)進(jìn)氣口,另一個(gè)插入塑料袋。
(2)接通氮?dú)膺M(jìn)氣路,打開操作室氮?dú)饪刂崎y,使兩只塑料袋充足氮?dú)夂螅P(guān)閉電磁閥,然后扎緊袋口。
(3)把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊
(4)把塑料袋內(nèi)氮?dú)鉂u漸的放于操作室內(nèi),至全部防除
7)操作室第二次置換(氮?dú)庵脫Q)重復(fù)一次沖氮過程,取樣室先抽真空,并注意隨時(shí)按排氣閥關(guān)閉排氣。
8)操作室第三次置換(混合氣體置換) (混合氣體配比為H2 1/85% H2 1/10% H2 1/10% CO2/15%)
(1)調(diào)換氣路打開操作室混合氣閥進(jìn)氣,沖氣時(shí)取樣室先抽真空,并注意隨時(shí)按排氣閥關(guān)閉排氣。
(2)混合氣充滿塑料袋后,關(guān)閉電磁閥,并打開混合氣限流閥,使混合氣經(jīng)過穩(wěn)流器、流量計(jì)、調(diào)整流量計(jì),流量為每分鐘10毫升左右。
(3)把塑料袋內(nèi)混合氣漸漸排于操作室內(nèi)。
(4)通過三次換氣后,操作室內(nèi)氣體含氧量已處于極為量狀態(tài)
9)操作室內(nèi)打開鈀粒除氧劑,接通除氧催化器電源進(jìn)行催化除氧,并在厭氧指示條反應(yīng)區(qū)上滴一點(diǎn)潔凈水,1-2小時(shí)后,觀察其變色情況,反應(yīng)部分深藍(lán)色變?yōu)闇\藍(lán)為操作室內(nèi)達(dá)到厭氧環(huán)境。
注:1指示條可反復(fù)使用,2 不可接觸蘭色反應(yīng)區(qū)3包春在密封管內(nèi),防止在干燥處。10紫外線滅菌燈,室內(nèi)進(jìn)行滅菌處理,滅菌時(shí)間自定。
(二)菌種的置入和培養(yǎng)
1)檢查取樣室內(nèi)門并關(guān)緊之。
2)打開取樣室外門,將菌種放入取樣室后即關(guān)上外們。
3)取樣室充氮置換三次過程,先抽真空度500毫米汞柱(66Kpa)以上停,然后打開取樣室氧氣閥進(jìn)氣,使指針回復(fù)零位,關(guān)掉閥。取樣室充氮置換三次過程結(jié)束。
4)如選定真空度較低就需要增加置換的次數(shù)。
5)取樣室外門開啟、關(guān)緊后,再抽低真空度100毫米汞柱(13Kpa)檢驗(yàn)。
6)厭氧培養(yǎng)箱需要長期連續(xù)使用的條件
(1)每天在操作室內(nèi)放入美蘭指示條觀察,如不能正常就必須重新?lián)Q氣。
(2)要長期連續(xù)輸入微量的混合氣體。使補(bǔ)進(jìn)的氮?dú)饽芎臀⒘康牡Y(jié)合通過催化吸收,保證了室內(nèi)厭氧狀態(tài),補(bǔ)入混合氣流量選定為每分鐘10毫升左右。
(3).連續(xù)培養(yǎng)運(yùn)行一天,更換一次除氧劑和干燥劑。(換下的除氧劑和干燥劑可放在200℃干燥箱內(nèi),干燥2-3小時(shí)可使其復(fù)原)
7)接種棒滅菌器的應(yīng)用:
(1)隨時(shí)用鎳?yán)与姛峤z使電極短路而變赤熱以進(jìn)行殺菌(接種棒)。
(2)熔蠟處可直接放上試管封蠟口旋轉(zhuǎn)熔蠟。
8)操作室理的培養(yǎng)箱理的培養(yǎng)箱內(nèi)的溫度可任意選擇和控制。
(三)注意事項(xiàng)
1.儀表盡可能地安裝于空氣清靜,溫度變化較小的地方。
2.開機(jī)前應(yīng)全面熟悉和了解各組成配套儀器、儀表的說明書、掌握正確的使用方法。
3.培養(yǎng)物放入必須是在操作室內(nèi)達(dá)到厭氧環(huán)境后放入。
4.如發(fā)生故障(停氣等原因)操作室內(nèi)仍可保持12小時(shí)厭氧狀態(tài)。(超過12小時(shí)則根據(jù)需要把培養(yǎng)物取出另作處理)。
5.經(jīng)常注意氣路有無漏氣現(xiàn)象。
6.調(diào)換氣瓶時(shí),注意要扎緊氣管,避免流入含氧氣體
7.真空泵按要求使用,定期檢查加油。
8.停止使用,關(guān)閉總電源鍵,及設(shè)備后部的電源開關(guān)
(四)常見故障及處理
現(xiàn)象 | 原理 | 處理 |
1、無電源 | 1、插頭未插或短線 | 1、插好插頭 |
2、熔斷器開路 | 2、更換同型號(hào)熔絲管 | |
3、電源開關(guān)壞 | 3、更換電源開關(guān) | |
2、培養(yǎng)箱不開蓋 | 1、設(shè)定溫度低 | 1、調(diào)整設(shè)定溫度 |
2、探頭壞 | 2、更探頭 | |
3、操作室、取樣室漏氣 | 1、密封不好 | 1、用肥皂水校漏后用704密封 |
2、年久橡皮圈老化 | 2、更換橡皮圈 | |
4、氣路不通 | 1、氣閥壞 | 1、更換氣閥 |
2、皮管漏氣或脫落 | 2、更換皮管 | |
3、氣瓶氣用完 | 3、更換氣體 | |
5、燈不亮 | 1、起輝器或燈不亮 | 1、更換起輝器或燈管 |
2、整流器燒壞 | 2、更換整流器 |
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