產品名稱:
人胰高血糖素樣肽1(GLP-1)ELISA Kit
英文名稱:Human ghcagons-like pepfide 1,GLP-1 ELISA Kit
產品分類:人內分泌系酶聯免疫吸附測定試劑盒[ELISA Kit for Human endocrinium]
檢驗方法:ELISA
包 裝:96T
人胰高血糖素樣肽1(GLP-1)酶聯免疫吸附測定試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供體外研究使用、不用于臨床診斷!
預期應用 ELISA法定量測定人血清、血漿或其它相關生物液體中GLP-1含量。
人胰高血糖素樣肽1(GLP-1)ELISA Kit實驗原理
用純化的GLP-1抗體包被微孔板,制成固相載體,往微孔中依次加入標本或標準品、生物素化的GLP-1抗體、HRP標記的親和素,經過*洗滌后用底物(TMB)顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的GLP-1呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度( 值),計算樣品濃度。
人胰高血糖素樣肽1(GLP-1)ELISA Kit操作步驟
實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫,試劑不能直接在37 溶解;試劑或樣品配制時,均需充分混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。
1、 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液 100 ,余孔分別加標準品或待測樣品100 ,注意不要有氣泡,加樣 時將樣品加于酶標板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37 溫育2小時。為保證實驗結果有效
性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2、 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100 (臨用前配制),酶標板加上覆膜,37 溫育1小時。
3、 棄去孔內液體,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400 /每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。
4、 每孔加檢測溶液B工作液(臨用前配制)100 ,加上覆膜,37 溫育1小時。
5、 棄去孔內液體,甩干,洗板5次,方法同步驟3。
6、 每孔加底物溶液90 ,酶標板加上覆膜37 避光顯色(反應時間控制在15-30分鐘,當標準孔的前3-4孔有明顯的梯度藍色,后3-4孔梯度不明顯時,即可終止)。
7、 每孔加終止溶液50 ,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物 液的加入順序相同。
8、 立即用酶標儀在450nm波長測量各孔的光密度( 值)。
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