固定液選擇的標(biāo)準(zhǔn)：

（1）好地保持細(xì)胞和組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)；

（2）大限度地保存抗原的免疫活性。一些含重金屬的固定液在免疫組化和細(xì)胞化學(xué)技術(shù)中是禁用的；

（3）不要用可能帶有自發(fā)熒光的固定劑，如帶有苦味酸的固定劑，還有甲醛升汞固定液，會(huì)使上皮細(xì)胞產(chǎn)生非特異性熒光；

（4）固定劑的選擇、固定時(shí)間、溫度和PH值都會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

常用的幾種固定液：

（1）4%中性甲醛固定液：能滿足常規(guī)HE及免疫組化、PCR等工作（Job）。中性甲醛是以PH7.2-7.4的磷酸緩沖液為溶劑配制的，其固定效果及對(duì)組織抗原性的保存均優(yōu)于一般的4%甲醛固定液。此固定液配制后應(yīng)密封并保存在陰涼處，保存時(shí)間不超過(guò)一個(gè)月。

甲醛（40%） 100ml

無(wú)水磷酸氫二鈉 6.5g

磷酸二氫鈉 4.0g

蒸餾水 900ml

（2）乙醇固定液：使用時(shí)以80%-95%的濃度為宜，具有硬化、固定、脫水等作用，對(duì)組織滲透力較弱，因此很少單獨(dú)使用，但其保存組織中的核酸強(qiáng)于中性甲醛，故常用于有核酸操作的實(shí)驗(yàn)或檢查，假如用于證實(shí)尿酸結(jié)晶和保存糖原，可用于100%乙醇固定組織。

（3）4%多聚甲醛固定液：主要用于培養(yǎng)細(xì)胞的固定。

混合固定液

（1）乙醇-甲醛（乙醇-福爾馬林，AF）固定液：適用于皮下組織中肥大細(xì)胞的固定。該固定液有固定兼脫水作用，固定后的標(biāo)本可直接入95%乙醇脫水。

甲醛（40%） 100ml

95%乙醇 900ml

（2）B5（醋酸鈉-升汞-甲醛）固定液：多用于固定淋巴組織。染色前應(yīng)進(jìn)行脫汞沉淀處理。

無(wú)水醋酸鈉 1.25g

升汞 6.0g

蒸餾水 90ml

使用前加入甲醛 10ml

（3）Bouin固定液：非凡適用于睪丸活檢組織的固定。Bouin液對(duì)組織固定較均勻，收縮很少，不會(huì)使組織變硬變脆。需現(xiàn)配現(xiàn)用。

飽和苦味酸水溶液（約1.22%） 75ml

甲醛 25ml

冰醋酸 5ml

（4）Carnoy固定液：穿透能力強(qiáng)，可很好的固定細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核，非凡適用于固定外膜致密的組織，也適用于糖原及尼氏小體的固定。

（5） Zenker固定液：經(jīng)此液固定的標(biāo)本，細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)染色頗為清楚，但成本較高且需非凡處理汞。該固定液要避免接觸陽(yáng)光，以免引起化學(xué)變化而失效。

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