各種動(dòng)物外周血和臟器組織白細(xì)胞分離試劑盒操作說明：

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試劑盒內(nèi)容：

全血及組織勻漿稀釋液100ml

細(xì)胞洗滌液100ml

試劑A 100ml

試劑E 100ml

說明書1份

操作方法：

A．取1ml新鮮抗凝血或組織勻漿單細(xì)胞懸液（細(xì)胞濃度為2×108-1×109個(gè)/ml，具體制備方法參照“組織單細(xì)胞懸液的制備”）與全血及組織勻漿稀釋液（Cat#：2010C1119）1：1混合再與1ml的E液混勻置20℃-25℃下自然沉降30分鐘。吸取渾濁的上清部分，棄去底部紅細(xì)胞備用；

B．將步驟A中所得的渾濁上清液體小心疊加在A液之液面上（上清液與A液的比例為1：1）；

C．以400g（約1500轉(zhuǎn)/分）離心15分鐘（半徑15cm水平轉(zhuǎn)子）；

此時(shí)離心管中由上至下細(xì)胞分四層。*層：為血漿層。第二層：為環(huán)狀乳白色單個(gè)核細(xì)胞。第三層：為混濁分離液層（此層液體中含有大量白細(xì)胞）。第四層：極少量紅細(xì)胞層（如無紅細(xì)胞層分離效果會(huì)更好），收集第二，三層混濁分離液及極少量紅細(xì)胞層（如無紅細(xì)胞層分離效果會(huì)更好）放入含細(xì)胞洗滌液（Cat#：2010X1118）4-5ml的試管中，充分混勻后，以500g（約1800轉(zhuǎn)/分）離心20分鐘，棄去上清留沉淀細(xì)胞重新懸起。重復(fù)洗滌2次即得所需白細(xì)胞。

注意

TBD 實(shí)驗(yàn)室的細(xì)胞分離培養(yǎng)基是敏光型的。這種培養(yǎng)基在運(yùn)輸和貯藏過程中應(yīng)避光保溫。由于各品牌離心機(jī)的性能不同，國內(nèi)南北地區(qū)溫度環(huán)境和四季的差異，可能影響分離效果，用戶可以調(diào)節(jié)離心轉(zhuǎn)數(shù)，調(diào)節(jié)離心的時(shí)間，摸索*的分離條件（具體分離條件各實(shí)驗(yàn)室自定）。組織，血液，細(xì)胞要求新鮮，避免冷凍和冷藏。

貯藏

18-25℃避光保存。啟封后置4℃保存。本品為真空包裝，未啟封前置于10℃以下易出現(xiàn)白色結(jié)晶，影響分離效果。

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