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干細胞分離液使用說明書

來源:上海易佰聚生物   2012年10月24日 10:00  

 

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備注:本公司銷售的所有產品僅用于生化科研試驗

 

各種動物或人外周血造血干細胞和骨髓間充質干細胞分離液操作說明和使用及保存中的注意事項:

 

本品為帶有乳光或微乳光的滅菌水溶液。主要成分是Ficoll 400 與泛影酸葡甲胺。適用于從組織勻漿中(胎牛血清或人血清懸起的勻漿細胞 1X107/ml)分離所需細胞,在醫療和醫學生物學研究中廣泛應用。

其他人及動物多種比重細胞分離液。注:因不同種屬不同比重分離液的細胞離散系數及細胞帶電不同,所以用戶在定制分離液時應提供所需分離液的比重、動物的種屬及被分離細胞的名稱。

 

使用方法:

1,例:取1ml肝素抗凝血與全血及組織勻漿稀釋液(或胎牛血清或人血清懸起勻漿的細胞 1X108/ml11混合再與1ml干細胞重懸液(產品編號:TBD2012SCB混勻置20度下自然沉降20-30分鐘。吸取渾濁的上清部分,棄去底部紅細胞備用。(使用本干細胞重懸液可zui終可獲得全血中約2%干細胞,若省去重懸步驟則只可獲得小于2%的干細胞。)

2,用吸取渾濁的上清部分液體小心疊加在本分離液之液面上(比例為11),20400g/分鐘,離心20分鐘(水平轉子),此時離心管中由上至下細胞分四層。

*層:為血漿或組織勻漿液層。

第二層:為環狀乳白色含所需干細胞。

第三層:為透明分離液層。

第四層;為極少紅細胞層,收集第二層細胞放入含細胞洗滌液(Cat#2010X11184-5毫升的試管中,充分混勻后,以1500-2000/分離心10-30分鐘。沉淀經反復洗2次即得所需干細胞。此方法效果較好,推薦使用

分離圖例:

 

注意事項

1. 啟封后應置4℃保存避免微生物的污染。

2. 細胞分離液從冰箱取出后,不可立即使用,需待溶液溫度升至室溫時,搖勻后使用。

3. 整個分離過程中,溫度應控制在18-28℃且在無菌環境下,避免微生物的污染,否則會影響分離質量。

 

應用

-從動物組織中分離所需細胞

 

特點

-密度變化率依照Ficoll 400,泛影酸和氫氧化鈉.

-*分離溶液的密度為參照具體產品的標簽

-生理學參數

-在低粘度時高密度

-無菌-即用型-溶液

 

產品質控

溶液                         注射用水

pH                             7.0-7.5

滲透壓               280-340mOsmol/kg

內毒素                        <5EU/ml

無菌                           已檢測

保存期限                          2

 

注意

TBD實驗室的細胞分離培養基是敏光型的。這種培養基在運輸和貯藏過程中應避光保溫。由于各品牌離心機的性能不同,國內南北地區溫度環境和四季的差異,可能影響分離效果,用戶可以調節離心轉數,調節離心的時間,摸索*的分離條件(具體分離條件各實驗室自定)。組織,血液,細胞要求新鮮,避免冷凍和冷藏。

 

貯藏

18-25℃避光保存。啟封后置4℃保存。本品為真空包裝,未啟封前置于10以下易出現白色結晶,影響分離效果。

 

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