Tissuelyser-24實(shí)驗(yàn)案例(快速提取DNA或RNA)
TissueLyser-24是小型的采用研磨珠的破碎儀,可同時快速處理24個樣品TissueLyser-24/48(以下內(nèi)容只是簡單介紹,詳細(xì)情況,可咨詢本公司,)
優(yōu)點(diǎn):
■可同時破碎多至24個樣品
■樣品適配器可在干冰或液氮中預(yù)冷,以避免生物分子降解
■能處理多種樣品,結(jié)果重現(xiàn)性高處理多至24個樣品
TissueLyser-24裝配上適配器就可以工作了,在2ml的離心管\中加入樣品和一粒研磨珠,多至24個樣品,然后將管子放入適配器,將適配器擰緊到TissueLyser-24的活塞上,活塞上下快速的震動使得研磨珠在樣品管中震動而將樣品磨碎并勻質(zhì)化。破碎的效果與廣泛使用的TissueLyserII(美國QIAGEN)相當(dāng),常規(guī)組織使用5mm鋼珠,必要時可多加1粒,研磨珠與進(jìn)口的研磨機(jī)通用
破碎組織。各種大鼠的組織使用TissueLyser-24(LT)和TissueLyserII分別破碎A在QIAcube上使用DNeasyBlood&TissueKit來純化25mg樣品中的DNA,產(chǎn)量用分光光度計(jì)測量。B在QIAcube上使用RNeasyFibrousTissueMiniKit(皮膚,心臟,肺)或RNeasyLipidTissueMiniKit(腦)。來純化20mg樣品中的RNA,產(chǎn)量用分光光度計(jì)測量。
高RIN值表明RNA高純度和完整性。大鼠心臟和肺(各20mg)使用TissueLyser-24(LT)破碎后,在QIAcube上使用RNeasyFibrousTissueMiniKit純化RNA,用Agilent2100bioanalyzer來分析RIN值分別為8.3(心臟)和9(肺)。
完整的蛋白質(zhì)用于各種分析。各種大鼠組織(各25mg)經(jīng)AllprotectTissueReagent穩(wěn)定后使用TissueLyser-24(LT)或TissueLyserII破碎,然后使用QproteomeMammalianProteinPrepKit抽提總蛋白,用westernblotting檢測。A轉(zhuǎn)膜后用PonceauS染色BwesternBlot檢測。LT:TissueLyser-24(LT);II:TissueLyserII;M:分子量標(biāo)記。
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