培養箱運行數月后，水箱內的水因揮發可能會減少，當低水位指示燈亮時應補充加水。先打開溢水管，用漏斗接橡膠管從注水孔補充加水使低水位指示燈熄滅，再計量補充加水，然后堵塞溢水孔。
1. 鋼瓶壓力低于0.2MPa時應更換鋼瓶。
2. 二氧化碳培養箱未注水前不能打開電源開關，否則會損壞加熱元件。
3. 二氧化碳培養箱可以做高精度恒溫培養箱使用，這時須關閉CO2控制系統。　
4. 因為CO2傳感器是在飽和濕度下校正的，因此加濕盤必須時刻裝有滅菌水。　
5. 當顯示溫度超過置定溫度1℃時，超溫報警指示燈亮，并發出尖銳報警聲，這時應關閉電源30分鐘；若再打開電源(溫控)開關仍然超溫，則應關閉電源并報維修人員。　
6. 盡量減少打開玻璃門的時間。如果二氧化碳培養箱長時間不用，關閉前必須清除工作室內水分，打開玻璃門通風24小時后再關閉。
7. 搬運培養箱前必須排除箱體內的水。排水時，將橡膠管緊套在出水孔上，使管口低于儀器，輕輕吸一口，放下水管，水即虹吸流出。搬運二氧化碳培養箱前應拿出工作室內的擱板和加濕盤，防止碰撞損壞玻璃門。搬運培養箱時不能倒置，同時一定不要抬箱門，以免門變形。
8. 清潔二氧化碳培養箱工作室時，不要碰撞傳感器和攪拌電機風輪等部件。拆裝工作室內支架護罩，必須使用專用扳手，不得過度用力。
二氧化碳培養箱的使用在許多細節方面或許很多人都會忽視，有了上述對于二氧化碳培養箱的一些使用技巧方面的說明，相信您在以后使用它是不會再為某些被忽視的細小問題而感到困擾。