手機版
化工儀器網(wǎng)手機版
化工儀器網(wǎng)小程序
官方微信
公眾號：chem17
掃碼關(guān)注視頻號
Chondrex公司提供一系列用于蛋白質(zhì)純化的填料樹脂。Chondrex總結(jié)了下面不同蛋白純化方法，以幫助您選擇合適的填料樹脂來純化目的蛋白。如需購買Chondrex公司產(chǎn)品，咨詢產(chǎn)品技術(shù)問題，請聯(lián)系Chondrex授權(quán)代理商欣博盛生物。
1.離子交換色譜法(1，2)
●. 每個蛋白質(zhì)都帶有凈電荷，故蛋白質(zhì)具有等電點(pI)，等電點由蛋白質(zhì)的一級氨基酸序列決定。這種帶電性質(zhì)允許蛋白質(zhì)在離子交換色譜中選擇性地與帶相反電荷的填料樹脂結(jié)合。這項技術(shù)利用了帶正電荷的樹脂(陰離子交換:DEAE和Q)，或帶負電荷的樹脂(陽離子交換:CM)。然后，pH或鹽梯度的改變會促使蛋白質(zhì)從填料樹脂中的被洗脫下來。
2.親和層析(3)
●. 親和層析是通過生物分子間強而可逆的相互結(jié)合的方式來純化特定蛋白質(zhì)的高效方法，這種方法在色譜填料樹脂上固定了一種可以與其他蛋白相互作用的蛋白質(zhì)，允許通過改變條件，如pH或鹽濃度，選擇性結(jié)合某種目標(biāo)蛋白并隨后洗脫該目標(biāo)蛋白。
蛋白純化填料樹脂
離子交換純化 | 抗體親和純化 | His-tag蛋白親和純化 | |
Ligand or Chemistry (Catalog #) | DEAE: 9079 (5 ml) Q:9081 (5 ml) CM: 9080 (5 ml) | Protein A:9076 (1 ml) Protein G:9077 (1 ml) | Ni-IMAC:9078 (5 ml) |
Base Support | DEAE:Highly cross-linked 6% Sepharose Q:Highly cross-linked 6% Sepharose CM:Highly cross-linked 6% Sepharose | Protein A: Rigid, highly crosslinked Agarose Protein G: Highly cross-linked 4% Sepharose | Highly cross-linked 6% Sepharose |
Formats | A drip column / column chromatography | A drip column / column chromatography | A drip column / column chromatography |
Binding Capacity (mg/ml) | DEAE: Weak anion exchange 110-160 μmol Cl- /ml media
Q: Strong anion exchange 180-250 μmol Cl- /ml media
CM: Weak cation exchange 90-130 μmol H+/ml media | Protein A: 60 mg (human IgG)/ml media
Protein G: ≥ 20 mg (human IgG/ml media | ≥ 40 mg (His-tag protein)/ml media
16-23 μmol (Ni2+) /ml media |
Equivalent Products | DEAE Sepharose 4FF Q Sepharose 4FF CM Sepharose 4FF | MabSelect sure LX Protein G Sepharose 4FF | Ni Sepharose 4FF |
Protein A/G對不同物種免疫球蛋白類型的親和力
●. Protein A和Protein G對各種免疫球蛋白(Ig)亞型、亞類和物種表現(xiàn)出特異性親和力,這種親和力由Ig Fc區(qū)的特性決定。Chondrex在下表中列出了不同物種間Protein A和Protein G與免疫球蛋白亞類的相互作用強度。
物種 | 免疫球蛋白類型 | 與Protein A結(jié)合 | 與Protein G結(jié)合 |
Human | IgG(normal) | ++++ | ++++ |
IgG1 | ++++ | ++++ | |
IgG2 | ++++ | ++++ | |
IgG3 | - | ++++ | |
IgG4 | ++++ | ++++ | |
IgM | - | - | |
IgA | - | - | |
IgE | - | - | |
Mouse | IgG1 | + | ++++ |
IgG2a | ++++ | ++++ | |
IgG2b | +++ | +++ | |
IgG3 | ++ | +++ | |
Rat | IgG1 | - | + |
IgG2a | - | ++++ | |
IgG2b | - | ++ | |
IgG2c | + | ++ | |
Goat | IgG | +/- | ++ |
Rabbit | IgG | ++++ | +++ |
Sheep | IgG | +/- | ++ |
“-”:No binding，”+”:Weak binding，“++”:Binding，”+++”:Moderate Binding，”++++”:Strong Binding
參考文獻：
●. P.M.Cummins.K. D.Rochfort. B.F.O'Connor, lon-Exchange Chromatography: Basic Principles and Application.Methods Mol.Biol.1485,209-223(2017).
●. A.Jungbauer,R.Hahn,"Chapter 22 lon-Exchange Chromatography" in Methods in Enzymology, R.R.Burgess, Deutscher, Murray P., Eds.(Academic Press,2009)vol.463,pp.349-371.
●. M.Urh, D.Simpson, K.Zhao, Affinity chromatography: general methods. Methods Enzymol. 463,417-438(2009)
如需咨詢更多產(chǎn)品詳情，請聯(lián)系Chondrex中國授權(quán)代理商-欣博盛生物
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的，應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用，并注明“來源：化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源（非化工儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負責(zé)，不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源，并自負版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題，請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系，否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
采購中心