通常而言,無血清培養基包括了無血清培養基、無蛋白無血清培養基、無動物來源的無血清培養基、化學成分限定培養基等類型。
一、無血清培養基分類
1. 無血清培養基:是在基礎培養基里補充了一些添加物,包括人激素、牛的轉鐵蛋白、牛血清白蛋白等,廣泛的應用于多種細胞系的培養,比如造血細胞系的培養;
2. 無蛋白無血清培養基:該類培養基wanquan不含有血清和動物來源的蛋白,但仍包含來源于植物蛋白的水解物或合成多肽片段等其他衍生物。由于所含蛋白極低,并且蛋白成分明確,有利于重組蛋白的下游生產、分離和純化,總體成本也會大幅度下降。但其通用性較差,需要針對目標細胞株進行特異性的優化。目前主要應用于生命科學研究和基因工程藥物開發等領域;
3. 無動物來源的無血清培養基:是指以基礎培養基配制的培養液無需添加牛血清,且該培養基成分中不含有任何動物來源成分,即可培養細胞和維持生長。僅采用蛋白水解物、重組蛋白或其他化學物質來取代動物源蛋白。它既可以滿足細胞生長及增殖的需要,還能夠降低培養基的生產成本,提高重組蛋白類藥物安全性。目前主要應用于生物藥品的研發和生產中。比如CHO細胞、293細胞、Vero細胞、C6細胞等;
4. 化學成分限定培養基:此類培養基wanquan無血清、無蛋白,成分wanquan明確,可以保證培養基批次間的一致性。它不但有利于跟蹤細胞培養的代謝情況,而且在后續的分離純化中也非常方便,是目前最為安全和理想的培養基。可是并非所有的細胞都能在化學成分限定培養基中達到較高的表達水平,需要研究者和使用者根據具體的用途不斷改進設計方案和配方。
二、無血清培養基特點
優點 | (1)無血清培養基不含血清,提高了實驗的重復性、準確性和穩定性; (2)避免了血清所帶來的血源性污染等問題,減少血清未知成分對細胞的損傷; (3)相比于含有血清的培養基,大大簡化了生產過程; (4)無血清培養基中的蛋白質來源于重組蛋白或蛋白水解產物,提高了實驗效率; (5)無血清培養基的成分和含量相對明確,能提高細胞產品的質量并有利于產物的分離提純。 |
缺點 | (1)無血清培養基的生產成本較高,不利于商業化開發與應用; (2)多數無血清培養基的應用不廣泛,通用性較低,不具有普遍性; (3)細胞在無血清培養基中,對外界條件如物理和化學等因素的改變較敏感; (4)目前低血清培養基研究開發的相關數據缺乏在線交流,可查閱的資料有限,不能有效促進細胞“馴化”技術的發展。 |
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