酶催化的特點更加符合現代化社會對于綠色、環保的要求,酶催化具有高效性、專一性和溫和性。然而,由于大多數的酶是蛋白質,對于溫度、pH值等條件十分敏感,容易變質導致酶失活,因此酶催化的反應對于pH控制精度、靈敏度要求較高。以下是對綠色、高效的酶催化反應的pH控制的詳細分析
一、pH對酶催化反應的影響
影響酶活性:酶在最適pH范圍內表現出活性,大于或小于最適pH,都會降低酶的活性。這主要表現在兩個方面:一是改變底物分子和酶分子的帶電狀態,從而影響酶和底物的結合;二是過高或過低的pH都會影響酶的穩定性,進而使酶遭受不可逆破壞。
影響反應收率:許多酶催化反應最后收率不高,可能都是隨著反應進行,體系的pH值發生變化而未及時糾正導致。
影響產物構型:有些酶催化后的產物甚至只有單一的構型,如果pH控制不當,可能導致生成外消旋產物或其他非目標產物。
二、pH控制方法
緩沖液法:傳統的pH控制方法是配制緩沖液,使反應體系的pH值穩定在一定范圍內。然而,緩沖溶液存在有效緩沖范圍,并且大量緩沖溶液和反應體系存在一定的離子效應。
pH自動控制加液系統:該系統能夠實時檢測反應體系的pH值,并根據設定的目標pH值自動調整加酸或加堿的量,從而確保反應體系的pH值始終維持在設定范圍內。這種方法具有精度高、穩定性好、操作簡便等優點。例如,SC-100A pH自動控制加液系統就是一款集pH值實時在線或靜態控制、測量與自動加酸、加堿調整于一體的新型自動化控制設備。它廣泛應用于高等院校、科研院所實驗室、中試車間以及工業生產流程中特定pH溶液的配制和調節。
三、應用實例
在實驗室重現的文獻實例中,反應是3,5-二羰基己酸叔丁酯被選擇性地還原為(R)-3-羰基-5-羥基己酸叔丁酯。該酶催化反應體系會變得越來越酸,隨著反應的進行,體系內pH會不斷下降。如果不及時中和掉生成的酸,可能會引起酶的失活,導致反應無法繼續進行,或者反應物繼續反應但生成外消旋產物。采用pH自動控制加液系統(如EasyMax & SevenExcellence組合)可以實現實時pH反饋控制。在全自動加料泵中加入5%的氫氧化鈉水溶液,設定目標pH值為6.9。體系開始反應后,pH一旦低于預設值6.9,便會根據pH變化速率自動滴加適量的堿來中和生成的酸。結果表明,pH值一直被有效地控制在6.85~6.95之間,保障了酶的有效催化活性以及酶催化反應的順利進行。
綜上所述,綠色、高效的酶催化反應需要精確的pH控制。通過采用先進的pH自動控制加液系統可以實現對反應體系pH值的實時監測和精確控制,從而確保酶催化反應的順利進行并提高產物的質量和收率。