SRB 介紹

磺酰羅丹明 B（Sulforhodamine B，SRB）是一種粉紅色的陰離子染料，在細胞生物學研究中被廣泛用于細胞增殖和細胞毒性的檢測。SRB 可以與細胞內的蛋白質結合，形成穩定的復合物，其顏色強度與細胞內的蛋白質含量成正比。

技術原理

蛋白質結合：SRB 能夠與細胞內的堿性氨基酸殘基結合，特別是與精氨酸、賴氨酸和組氨酸等殘基結合。這種結合是相對穩定的，并且在酸性條件下不易解離。

顏色強度與蛋白質含量的關系：SRB 與細胞內蛋白質結合后，形成的復合物在特定波長下具有較高的吸光度。吸光度的大小與細胞內的蛋白質含量成正比，因此可以通過測量吸光度來間接反映細胞的數量或生物量。

運輸和保存方法

冰袋運輸。4℃保存，2年有效。

使用方法

1. 取出細胞，棄去培養液；

2. 小心加入固定液，每孔100 µL，4℃孵育1 h，棄去固定液；

3. 加入清洗液1，每孔100 µL，室溫下靜置30 s，棄去清洗液1，重復該步驟；

4. 加入染色液，每孔50 µL，室溫下避光孵育15 min，棄去染色液；

5. 加入清洗液2，每孔100 µL，棄去清洗液2（該步驟需快速完成，以免染色漏出胞外），重復該步驟5-10次，直至把多染料洗盡為止；

6. 加入溶解液，每孔100 µL，室溫下避光孵育5 min；

7. 于515 nm波長檢測其吸光值。

相關問題

Q：SRB染色是否會影響細胞的活性？

A：SRB染色本身通常不會對細胞的活性產生明顯影響。但是，在固定和染色過程中，要注意使用適當的條件，避免對細胞造成過度損傷。

Q：SRB染色與MTT法、CCK-8法等如何選擇？

A：MTS、CCK8及SRB法等都是用來檢測細胞代謝活性的方法，可根據實驗要求和預算進行選擇。

Q：如何處理 SRB 染色后的廢液？

A：SRB 染色后的廢液含有酸性和有毒物質，應按照實驗室的規定進行妥善處理。一般來說，可以將廢液收集在特定的容器中，經過中和和處理后再排放。

相關產品