色譜技術(shù)是一種廣泛應(yīng)用于化學(xué)分析的分離方法，通過樣品在固定相和流動相之間的分配差異，實(shí)現(xiàn)混合物中各組分的分離和檢測。以下是色譜技術(shù)的基本概念和分類，以及其應(yīng)用領(lǐng)域的簡介。

  色譜技術(shù)的基本概念  

1、固定相

固定相是色譜系統(tǒng)中用于吸附或分配樣品組分的材料，可以是固體或液體，通常涂覆在支持介質(zhì)上。固定相的特性決定了分離的選擇性。

2、流動相

流動相是帶動樣品通過固定相的液體或氣體，樣品組分在流動相和固定相之間分配，形成不同的滯留時間，從而實(shí)現(xiàn)分離。

3、保留時間保留時間

樣品組分從進(jìn)樣到被檢測到所需的時間，用于表征不同組分的分離行為。

4、分離機(jī)制

樣品分離主要基于以下機(jī)制之一或組合：

吸附作用

分配作用

離子交換

分子排阻

  色譜的分類  

根據(jù)操作模式和分離原理，色譜技術(shù)主要分為以下幾類：

1、按流動相分類

氣相色譜：

以氣體為流動相，適合揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性樣品。

液相色譜：

以液體為流動相，適合不揮發(fā)或熱不穩(wěn)定樣品。

2、按固定相分類

柱色譜：

固定相填充在色譜柱中，是最常見的形式。

薄層色譜：

固定相涂覆在玻璃板或塑料片上，適合快速篩查。

3、按分離機(jī)制分類

分配色譜：

利用樣品在流動相和固定相間的溶解性差異。

吸附色譜：

利用樣品分子與固定相表面吸附能力的不同。

離子交換色譜：

利用樣品離子與固定相離子交換能力的差異。

凝膠色譜：

根據(jù)分子大小差異進(jìn)行分離，也稱分子篩色譜。

  液相色譜（HPLC）的知識  

HPLC 是現(xiàn)代液相色譜的技術(shù)，使用高壓泵驅(qū)動流動相，固定相通常是填充在色譜柱中的顆粒材料。

1、主要組件

泵：提供高壓流動相輸送。

進(jìn)樣器：用于準(zhǔn)確控制樣品的進(jìn)樣量。

色譜柱：包含固定相，用于分離樣品。

檢測器：檢測經(jīng)過色譜柱后的樣品組分，常見類型有UV、熒光、質(zhì)譜等。

2、分離模式

正相色譜：固定相極性高，流動相極性低，適合非極性化合物分離。

反相色譜：固定相極性低（如C18柱），流動相極性高，適合極性化合物分離。