常見核酸提取純化方法苯酚氯仿抽提法、磁珠法核酸分離技術、離心柱純化法等,今天我們來看下離心柱法的實驗步驟和優缺點吧~
一、離心柱法提取DNA步驟
離心柱法提取DNA步驟一
將組織或細胞懸液加入裂解緩沖液,渦旋混勻。裂解緩沖液中含有變性劑(如胍異硫氰酸鹽),可以有效地裂解細胞和組織,破壞細胞膜和細胞核膜,同時使核酸與蛋白質分離。
離心柱法提取DNA步驟二
將裂解液轉移到DNA Spin Column中,離心收集流穿液。這個步驟涉及到將裂解液通過一個特殊的膜過濾,該膜具有特定的孔徑,允許小分子如RNA和蛋白質通過,而DNA由于其較大的分子尺寸被截留在膜上。
離心柱法提取DNA步驟三
用Washing Buffer洗滌DNA柱膜。Washing buffer中含有乙醇和鹽,可以去除雜質和蛋白質,保留DNA在柱膜上。
離心柱法提取DNA步驟四
將Elution Buffer加入到柱中,離心收集純化的DNA。Elution Buffer是低鹽緩沖液,能有效洗脫柱膜上結合的DNA,得到純化的基因組DNA。因為DNA在低鹽條件下更容易溶解。離心后,收集純化的DNA到一個新的收集管中。
離心柱法提取DNA步驟五
提取完成后,使用紫外分光光度計測定DNA的濃度和純度,通過測定260nm和280nm的吸光度比值來評估DNA的質量和蛋白質污染情況。
離心柱法提取DNA步驟六
純化的DNA應妥善存儲于-20°C或更低的溫度下,以保持其穩定性和防止降解。
二、離心柱法提取DNA的優缺點:
1. ?優點?
操作簡便,適合微量操作。
使用常見的試劑和藥品,成本較低。
2. ?缺點?
高度依賴吸附膜的結合能力。
洗脫不wanquan可能導致核酸流失。
無法大量提取核酸。
據小編所知,凡知醫學、中科百抗有多款離心柱式提取核酸產品,如感興趣,請聯系天津益元利康生物科技有限公司,為您提供離心柱式提取核酸產品,助力您的科研之路!
相關產品
免責聲明
- 凡本網注明“來源:化工儀器網”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品,未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的,應在授權范圍內使用,并注明“來源:化工儀器網”。違反上述聲明者,本網將追究其相關法律責任。
- 本網轉載并注明自其他來源(非化工儀器網)的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時,必須保留本網注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內容、版權等問題,請在作品發表之日起一周內與本網聯系,否則視為放棄相關權利。