MAN1B1抗體的保存與使用方法及應用領域與實例！

一、背景知識

MAN1B1抗體是一種在科研和臨床診斷中具有特定用途的抗體，它主要用于檢測和量化細胞或組織中蛋白MAN1B1的表達水平。MAN1B1蛋白在人體中扮演著重要的角色，特別是在蛋白質運輸和代謝過程中。在某些疾病狀態下，例如某些類型的癌癥或神經系統疾病，MAN1B1的表達水平可能會發生改變。因此，對其抗體的使用可以幫助科研人員和醫生更好地理解相關疾病的病理機制或評估治療效果。

MAN1B1抗體是一種針對MAN1B1（內質網α-甘露糖苷酶1）蛋白的特異性抗體，廣泛應用于生物學研究和醫學診斷中。以下是關于MAN1B1抗體的詳細介紹：

二、基本信息

抗體名稱：MAN1B1抗體

靶點：MAN1B1蛋白（內質網α-甘露糖苷酶1）

來源：通常由兔子（Rabbit）、山羊（Goat）或其他動物通過免疫制備得到

克隆性：可以是單克隆（Monoclonal）或多克隆（Polyclonal）

亞型：通常為IgG

規格與價格：不同供應商提供的MAN1B1抗體規格和價格可能有所不同。例如，某些品牌的MAN1B1抗體規格為100µg/0.5ml，價格范圍在61.0?279.0之間（美元）。而國內供應商的價格可能以人民幣計價，具體價格請參考各供應商提供的信息。

三、產品特性

特異性：MAN1B1抗體具有高度特異性，能夠準確識別并結合MAN1B1蛋白。

穩定性：產品穩定性好，能夠在適當的保存條件下長期保持活性。

應用范圍：MAN1B1抗體可用于多種實驗技術中，包括Western Blotting（WB）、Immunohistochemistry（IHC）、Immunofluorescence（IF）、ELISA等。具體應用范圍請參考各供應商提供的產品說明書。

四、保存與使用

保存條件：MAN1B1抗體應儲存在適當的溫度下，通常為-20°C或更低溫度，以避免抗體失活。請按照供應商提供的保存條件進行儲存。

使用前準備：使用前請確保MAN1B1抗體已恢復至室溫，并按照實驗需求進行稀釋。

注意事項：在使用過程中，請避免反復凍融MAN1B1抗體，以免影響其活性和穩定性。

五、應用領域

MAN1B1抗體在生物學和醫學研究中具有廣泛的應用領域，包括但不限于：

腫瘤研究：MAN1B1與腫瘤的發生、發展密切相關，MAN1B1抗體可用于腫瘤相關蛋白的檢測和鑒定。

細胞生物學：MAN1B1作為內質網中的一種重要酶類，參與多種細胞生物學過程。MAN1B1抗體可用于研究這些過程的分子機制。

免疫學：MAN1B1可能與免疫系統的功能調節有關，MAN1B1抗體可用于免疫學相關實驗和研究。

六、供應商與品牌

市場上有多家供應商和品牌提供MAN1B1抗體產品，如Santa Cruz Biotechnology、上海雅吉生物科技有限公司、北京索萊寶科技有限公司等。不同供應商和品牌的產品在規格、價格、質量和服務等方面可能存在差異，用戶可以根據自身需求選擇合適的抗體產品。

七、應用實例

MAN1B1抗體可以用于改造人腎胚細胞HEK293以生產高甘露糖型溶酶體蛋白：

研究構建了可以生產高比例的高甘露糖型糖蛋白和低比例的復合型糖蛋白的細胞株。

首先在HEK293細胞中敲除(Knock Out,KO)了兩個高爾基體(Golgi)α1,2-甘露糖苷酶Ⅰ的控制基因(MAN1A1和MAN1A2)。結果顯示單敲細胞株MAN1A1KO-24和MAN1A2KO-37中的N-糖鏈結構幾乎沒有發生改變,而在MAN1A1和MAN1A2雙敲細胞(Double KO,D-KO)中,與野生型對比凝集素ConA-FITC染色后信號增加為野生型的四倍,高甘露糖型N-糖鏈增加,PHA-L4-FITC凝集素染色信號下降15%,復合型N-糖鏈減少。但復合型N-糖鏈依然在D-KO細胞中被檢測存在,為了清除剩余的復合型N-糖鏈,在篩選了人源細胞中與N-糖鏈合成途徑可能存在關聯的α1,2-甘露糖苷酶Ⅰ基因后,發現敲除一個編碼內質網(ER)α1,2-甘露糖苷酶Ⅰ基因(MAN1B1)可以減少幾乎所有復合型糖鏈。在這個三敲細胞株(MAN1A1、MAN1A2和MAN1B1的Triple KO,T-KO)中,相較于野生型細胞,ConA-FITC染色后信號增加為野生型的5.3倍,高甘露糖型糖鏈比例相較于D-KO進一步增加,凝集素ConA-FITC染色后信號與背景幾乎相同,遠低于野生型數值。同時對野生型、D-KO細胞和T-KO細胞進行全細胞糖鏈分析,野生型存在至少27種不同類型糖鏈,D-KO細胞依然存在復合型糖鏈,在T-KO細胞株中則不能檢測到復合型糖鏈。

利用三敲細胞(T-KO)表達重組溶酶體蛋白α-半乳糖酶A(GLA)和溶酶體酸性脂肪酶(LIPA),MAN1B1抗體免疫印跡(Western Blot)結果顯示在T-KO細胞中表達的重組溶酶體蛋白上的糖鏈對糖苷酶EndoHf處理敏感,暗示T-KO細胞表達的GLA和LIPA蛋白上的N-糖鏈為高甘露糖型糖鏈。同時使用野生型細胞和T-KO細胞表達人源重組蛋白EGFPFLAG-HyHEL10和溶酶體酸性脂肪酶后,通過MALDI-TOF飛行質譜對蛋白上糖鏈進行分析,在野生型中抗體分子上糖鏈主要為復合型,T-KO細胞中為高甘露糖型。野生型細胞溶酶體酸性脂肪酶分子上糖鏈既有復合型又有高甘露糖型,而T-KO細胞則全部為高甘露糖型,并且主要為Man9-GlcNAc2和Man8-GlcNAc2的形式。

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