SOC培養(yǎng)基的實(shí)驗(yàn)原理和質(zhì)控方法
一、用途
用于基因工程菌大腸桿菌培養(yǎng)。
二、培養(yǎng)基配方(g/L)
胰蛋白胨 | 20.0 |
酵母浸粉 | 5.0 |
氯化鈉 | 0.5 |
氯hua鉀 | 0.186 |
氯化鎂 | 0.95 |
硫酸鎂 | 1.2 |
葡萄糖 | 3.6 |
pH值7.0±0.2 25℃ |
三、原理
胰蛋白胨和酵母浸粉提供基本營(yíng)養(yǎng),氯hua鉀、氯化鈉和氯化鎂可維持滲透壓并提供細(xì)菌生長(zhǎng)所需的基本元素,促進(jìn)有關(guān)酶的合成,葡萄糖提供碳源。
四、試驗(yàn)方法
1、稱取本品31.4克,加熱溶解于1000ml蒸餾水,分裝于試管中,每管9ml,116℃高壓滅菌30分鐘,備用。
2、將標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)控菌株稀釋至合適梯度,制備成含菌量10-100CFU/mL的菌懸液。
3、將稀釋至合適梯度的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株接種到試管中,同時(shí)接種兩個(gè)平行管,置于36±1℃培養(yǎng)18-24h。
五、結(jié)果觀察與解釋
接種以下質(zhì)控菌株,在36±1℃培養(yǎng)18-24小時(shí):
質(zhì)控菌株 | 菌株編號(hào) | 接種量(CFU) | 生長(zhǎng)情況 | 其他特征 |
大腸埃希氏菌 | ATCC25922 | 10-100 | +++ | 渾濁 |
大腸埃希氏菌 | ATCC11775 | 10-100 | +++ | 渾濁 |
大腸埃希氏菌 | CMCC44568 | 10-100 | +++ | 渾濁 |
圖1-1 SOC培養(yǎng)基微生物質(zhì)控結(jié)果
備注:a:大腸埃希氏菌(ATCC11775),b:大腸埃希氏菌(ATCC25922),c:大腸埃希氏菌(CMCC44568),d:空白對(duì)照
六、注意事項(xiàng)
本培養(yǎng)基僅為細(xì)菌鑒定的一部分,需做其他補(bǔ)充試驗(yàn)。
注:本文屬海博生物原創(chuàng),未經(jīng)允許不得轉(zhuǎn)載。
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