細胞培養基不僅為細胞提供必要的營養物質,還為細胞的生長和繁殖提供適宜的環境。在細胞培養的過程中,選擇合適的培養基是養好細胞的第一步。
本期細胞學堂將為大家詳細介紹一些特殊的培養基,以及選用時的相關指標,幫助您快速上手選擇合適的培養基,以滿足不同實驗需求。
常見細胞培養基可分為基礎培養基、完-全培養基和無血清細胞培養基三類。
在去年發布的干貨中,我們詳細介紹了關于MEM、DMEM、RPMI 1640、無血清培養基等常見培養基,感興趣的可以回顧下。
基礎培養基主要是指未添加血清的合成培養基以及一些專為特定原代細胞設計的專用基礎培養基。
無血清培養基是指通過添加已知成分的組分(如轉鐵蛋白、白蛋白、胰島素等)替代血清,用于特定細胞培養的培養基。
完-全培養基是指在基礎培養基的基礎上添加了血清的培養基,可能還含有一些特殊的細胞生長因子、抗生素(如雙抗)等。
特殊細胞培養基屬于合成培養基,通常需要搭配血清或者血清替代物來配制成完-全培養基后使用。
由Glen Fischer在美國國家癌癥研究所設計研制,最初用于小鼠白血病細胞的培養,現主要用于造血細胞的培養,如淋巴母細胞和淋巴細胞的培養。
該培養基含有多種細胞生長所需的氨基酸、維生素以及無機鹽等成分,不含蛋白質、脂類或任何外源性生長因子。
由William和Gunn共同研制,主要用于大鼠肝上皮細胞的培養,也可用于其他哺乳動物的肝細胞培養。
該培養基含有多種細胞生長所需的氨基酸、維生素以及無機鹽等成分,不含蛋白質、脂類或任何外源性生長因子,可以根據研究需要來調整L-谷氨酰胺的用量,在使用時添加新鮮的L-谷氨酰胺或其替代物更利于細胞的生長與增殖。
MCDB是為特定細胞設計的低蛋白和無血清培養的培養基,MCDB 131是MCDB培養基的一種,是由Knedler和Ham設計開發出來的,最初用于培養人微血管內皮細胞(HMVEC)。隨著深入的研究,MCDB 131培養基除用于內皮細胞外,還可用于包括肝細胞、平滑肌細胞、心肌細胞在內的多種細胞類型。
MCDB 131培養基不同于傳統培養基之處在于,其含有微量元素、腐胺、腺嘌呤、胸腺嘧啶以及更高濃度的氨基酸和維生素。該培養基在使用時常與表皮生長因子(EGF)、氫化可的松、谷氨酰胺以及低濃度血清搭配使用,血清的添加濃度需根據細胞類型而定。
Opti-MEM I 減血清培養基,是一種經過改良的最-低必需培養基,可以在減少50%常規血清用量的情況下,維持細胞的正常增殖。這一特性使其在細胞轉染等實驗操作中尤為適用。
01
糖的濃度
高糖培養基通常適合高代謝率及高密度細胞的培養。
02
酚紅
酚紅是一種酸堿指示劑,用于輔助判斷試劑的pH值變化。酸性環境下偏黃色,堿性環境下偏紫色。
03
GlutaMAX
L-丙氨酰-L-谷氨酰胺,是L-谷氨酰胺的升級版本。L-谷氨酰胺在溶液中容易降解,但L-丙氨酰-L-谷氨酰胺具有良好的穩定性,可以作為L-谷氨酰胺的替代物。
04
鈣、鎂離子
鈣、鎂離子在細胞培養中有助于細胞彼此相連,增強細胞的黏附性,培養懸浮細胞可選擇無鈣鎂離子的培養基。
以上是關特殊細胞培養基及選用指標的介紹,更多細胞培養相關干貨,請持續關注細胞學堂專欄~
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