IVIS®Lumina III是PerkinElmer最新推出的第三代小動物活體光學二維成像平臺。該系統秉承了前幾代IVIS系列共有的作為業內金標準的高靈敏度生物發光二維成像性能,并且進一步優化了熒光二維成像性能,將濾光片標準配置數量增加至26個,同時引入了作為熒光多光譜成像金標準的純光譜分析技術(CPS),使得Lumina III成為同時擁有生物發光及熒光二維成像金標準的高性能活體成像平臺。
生物發光及多光譜熒光二合一技術
IVIS Lumina III將數年積累的先進光學成像技術整合于一體,打造出一個易于操作且性能非凡的多模式活體光學成像系統。通過使用Lumina III,研究者可自動實現明場、高靈敏生物發光、多光譜熒光及放射性核素成像的聯合使用。依托多達26個濾光片的配置,使用者可對從綠光到近紅外光的幾十種熒光探針進行成像。
光譜拆分技術
目前,所有Lumina III系列成像系統均已整合了PerkinElmer純光譜分析(CPS)算法,憑借這一業內熒光多光譜分析金標準,研究者可精確實現背景熒光扣除、探針純光譜信息提取、信號光譜特征分類、多種熒光探針分離、圖像疊加以及熒光信號的準確定量。配備的新型激發光源,使光源激發效能在整個成像光譜范圍內(400 - 900 nm) 始終處于高水平,有效增強了系統對深層熒光信號的探測能力。
高光學成像靈敏度
IVIS Lumina III提供了目前市場上較高的光學成像靈敏度,可檢測小鼠皮下單個生物發光細胞。這依托了高性能的成像硬件配置,包括具有量子效率的背照射背部薄化科學一級CCD芯片、低至-90℃的CCD制冷溫度以最大限度的降低暗電流及讀出噪音、高至f/095光圈大小的優質鏡頭、高透光率(>95%,OD≥7)的激發及發射濾光片以及高品質的成像暗箱。系統所具備的靈敏度,保證使用者在進行各種研究應用時具備堅實的技術基礎。
圖 1. 小鼠皮下移植單個4T1-luc2細胞的成像結果。利用IVIS成像系統并結合BiowareUltra 生物發光腫瘤細胞株,可在活體水平觀測腫瘤的生長及轉移,IVIS系統所具備的高靈敏度使得研究者在腫瘤發展早期即可檢測到腫瘤信號,并觀測腫瘤初期的發展變化。
圖2. 利用不同波長的探針并結合IVIS的多光譜成像技術,分離獲得小鼠體內肺部(800 nm)、肝部(680 nm)、腸道(660 nm)及 組織自發背景熒光的信號。
圖 3. 利用IVIS系統及Her2Sense 645熒光試劑觀測Scid/Beige雌性小鼠攜帶的SKOV-3腫瘤。圖中所示為尾靜脈注射40mg Her2Sense645后,5h 、24h 、48h的活體熒光成像結果,以及腫瘤本身的生物發光成像結果。
IVIS Lumina III 配備了多種成像附件, 以在需要時對系統的成像功能進行擴展。如可選配成像視野放大或縮小鏡 頭,將成像視野范圍擴大至2.5-24cm,實現對5只小鼠或2只中等體型的大鼠進行同時成像。 Lumina III除了能對活體 小動物進行成像外,還可進行培養皿、微孔板等體外成像應用。
圖4.IVIS Lumina III成像系統可提供5個成像視野
專業的活體光學成像分析軟件 – Living Image
Living Image® 軟件是專為IVIS系列成像平臺設計的,用于進行活體成像圖像采集和數據分析的高級軟件。軟件直觀明了的人性化操作界面,使得所有使用者均可快速上手。通過內置的成像設置向導(Imaging Wizard),使用者可以輕松完成各種拍攝條件及拍攝程序的設定,并利用專業的分析模塊對成像數據進行精準的定性及定量分析。軟件內置探針庫能夠自動設置最佳成像濾光片。Living Image支持動態對比度增強(DyCE™)成像技術,這是一種利用發光、放射性同位素或熒光探針的代謝特性,對化合物進行基于光學成像的體內生物分布分析和解剖學鑒定的新方法;還支持細胞發光曲線測定功能,根據微孔板成像數據,自動計算細胞的發光曲線 及單細胞發光強度。
圖5.向右側腹攜帶4T1-luc2皮下腫瘤的小鼠尾靜脈注射315 µCi18F-FDG。從注射后55秒開始進行動態成像,通過Cerenkov輻射成像觀測18F-FDG在小鼠體內的分布。
珀金埃爾默小動物活體成像系統為生物醫學的各種研究領域(包括腫瘤、干細胞、傳染病、炎癥、免疫性疾病、神經疾病、心血管疾病、代謝疾病、基因治療、納米材料、新藥研發、植物學等)提供了完整的成像解決方案。
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