手機版
化工儀器網手機版
化工儀器網小程序
官方微信
公眾號：chem17
掃碼關注視頻號
水性C18色譜柱是一種專門設計用于在高水相流動相條件下工作的反相高效液相色譜（HPLC）柱。它通常用于極性和親水性化合物的分離。以下是水性C18色譜柱的通用使用指南：
1.色譜柱的安裝
檢查與連接：在安裝前確保色譜柱處于良好狀態，沒有損壞。使用適配器將色譜柱牢固地連接到HPLC系統中，確保無泄漏。
沖洗：在初次使用或長時間不使用之后，應使用純溶劑（如甲醇或乙腈）沖洗色譜柱，通常以0.5-1.0mL/min的流速進行15-30分鐘的沖洗。
2.流動相的選擇與制備
高水相流動相：由于這是水性C18色譜柱，應使用高水相比例的流動相，典型的是80%以上的水相。常用的水相包括純水、含有少量緩沖鹽的水溶液（如磷酸鹽緩沖液）。
有機相助溶劑：常用的有機相助溶劑包括乙腈或甲醇。根據目標化合物的極性，調整有機相比例。
pH調節：對于大多數分析物，流動相的pH值應該控制在色譜柱能夠承受的范圍內（通常為2-8），并且應盡量接近中性以保護色譜柱。
3.樣品制備
樣品溶劑：樣品應溶解在流動相中或與流動相相似的溶劑中，以減少峰形變差和拖尾現象。
過濾：樣品溶液應通過0.22μm或0.45μm的濾膜過濾，以除去顆粒物，防止堵塞色譜柱。
4.操作條件
流速：一般建議在0.5-1.5mL/min的流速范圍內操作，根據具體分析需求調整。
柱溫：控制柱溫在20-40°C之間，具體溫度根據分離效果優化。
進樣量：為避免柱超載，通常推薦進樣量在1-20µL范圍內，根據樣品濃度和柱子尺寸調整。
5.色譜柱的維護
清洗：定期用高比例有機溶劑（如乙腈或甲醇）沖洗色譜柱，尤其是在連續使用后或更換流動相前。
儲存：短期存放時，用流動相進行沖洗并保持濕潤。長期存放時，建議用有機溶劑（如乙腈）沖洗后密封保存。
再生：如果色譜柱性能下降，可以嘗試用梯度沖洗法再生色譜柱，從高水相到高有機相，再返回高水相，逐步沖洗。
6.常見問題及處理
柱壓升高：檢查流動相和樣品是否有顆粒物，必要時更換過濾器或預柱。也可能需要用強溶劑沖洗色譜柱。
峰形變差：檢查樣品溶劑與流動相的匹配性，調整進樣量；確保色譜柱沒有堵塞或老化。
分離度下降：優化流動相比例、流速和柱溫，或考慮更換色譜柱。
通過遵循以上指南，可以有效地使用和維護水性C18色譜柱，確保其最佳性能和長使用壽命。
免責聲明
- 凡本網注明“來源：化工儀器網”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品，未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的，應在授權范圍內使用，并注明“來源：化工儀器網”。違反上述聲明者，本網將追究其相關法律責任。
- 本網轉載并注明自其他來源（非化工儀器網）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責，不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時，必須保留本網注明的作品第一來源，并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內容、版權等問題，請在作品發表之日起一周內與本網聯系，否則視為放棄相關權利。
采購中心