校準艾本德(Eppendorf)移液器是確保其準確性和精度的關鍵步驟。下面是詳細的校準步驟和注意事項,幫助您正確進行移液器的校準。
一、準備工作
在開始校準之前,需要準備以下工具和材料:
操作手冊:艾本德移液器的用戶手冊。
高精度天平:用于測量液體的質量,精度至少達到0.1 mg。
蒸餾水:用于校準過程中的液體。
校準工具:如移液器校準工具包,通常包括螺絲刀和校準軟件(如適用)。
溫度計:用于測量水的溫度,因為液體密度會受溫度影響。
吸頭:適用于移液器的高質量吸頭。
手套:佩戴手套以保持移液器的清潔,避免污染。
二、校準步驟
1. 預處理
檢查移液器:確保移液器干凈、干燥,并且沒有損壞。
環境條件:確保校準在恒溫恒濕的環境中進行,一般室溫為20-25°C,相對濕度為50-70%。
2. 校準步驟
1. 設置初始狀態
裝載吸頭:將適合的吸頭牢固地安裝在移液器上,確保無泄漏。
設置體積:根據需要校準的體積范圍,設置移液器到目標體積(例如,最大量程、中間量程和最小量程)。
2. 預濕吸頭
預濕吸頭:用蒸餾水吸取并排出幾次(通常3次),以預濕吸頭。這有助于減少吸頭內壁的液體殘留,提高校準精度。
3. 進行稱重
稱量空吸頭:將預濕后的吸頭重新裝上移液器,然后將移液器吸取設定體積的蒸餾水。
稱量水樣:將吸取的水樣排入干凈、干燥的稱量容器中,立即稱量容器的質量。記錄質量,精確到0.1 mg。
4. 計算體積
記錄溫度:測量并記錄蒸餾水的溫度。
計算密度:根據水的溫度,查找對應的水的密度(一般在20°C時為0.9982 g/cm3)。
計算體積:使用公式 計算體積,其中 是體積, 是水的質量, 是水的密度。
5. 調整移液器
檢查偏差:將計算得到的體積與設定體積進行比較,計算出偏差。
調整校準螺絲:如果偏差超出允許范圍(通常為±0.5%),使用校準工具調整移液器的校準螺絲。具體方法根據移液器型號不同,操作手冊中會有詳細說明。
6. 重復測量
重復校準過程:調整后,重新進行稱重和計算體積的步驟,確保每個量程的體積都在允許范圍內。通常需要進行至少3次測量,以確保結果的可靠性。
三、注意事項
保持清潔:在整個校準過程中,確保移液器和吸頭的清潔,避免污染影響測量結果。
恒定環境:盡量在恒溫恒濕的環境中進行校準,以減少環境因素對校準結果的影響。
使用新吸頭:每次測量時都使用新的吸頭,以避免交叉污染。
定期校準:根據使用頻率,定期校準移液器,確保其長期穩定性和準確性。一般建議每3-6個月校準一次。
通過以上詳細步驟,您可以正確地校準艾本德移液器,確保其在實驗中的高精度和可靠性。如果在校準過程中遇到問題,建議參考操作手冊或聯系專業技術人員獲取幫助。
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