加藥處理的細胞換液,需要遵循一定的操作步驟,確保實驗環(huán)境的無菌以及細胞的健康生長。以下是換液的一般步驟:
1 換液時間:一般建議每24或者48小時換液一次。
2 準備新的培養(yǎng)基:根據(jù)細胞類型和生長需求,選擇合適的培養(yǎng)基。確保培養(yǎng)基新鮮、無菌,并在使用前預熱至37℃。
收集舊培養(yǎng)基:輕輕搖晃培養(yǎng)瓶,使舊培養(yǎng)基充分混合。使用移液器將舊培養(yǎng)基收集到廢液缸。注意不要觸碰到細胞表面。
3 添加新培養(yǎng)基:將收集到的舊培養(yǎng)基丟棄,向培養(yǎng)瓶中加入新的培養(yǎng)基。確保新的培養(yǎng)基充分覆蓋細胞表面,避免氣泡產(chǎn)生,也可以部分換液,保留一部分舊培養(yǎng)基,同時加入新的含藥培養(yǎng)基,以維持藥物濃度和環(huán)境的穩(wěn)定性。
4 繼續(xù)加藥:根據(jù)實驗需求,向新的培養(yǎng)基中添加藥物。可以使用移液器直接加入藥物溶液,或者將藥物溶解在新的培養(yǎng)基中后再加入。
5 重新混勻:輕輕搖晃培養(yǎng)瓶,使細胞在新的培養(yǎng)基中均勻分布。
6 觀察細胞生長情況:在換液后,觀察細胞的生長情況和形態(tài)變化。如果細胞生長良好,可以繼續(xù)按照實驗計劃進行。如果細胞生長受到抑制或出現(xiàn)異常,需要及時調(diào)整實驗方案。
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