頂空毛細管柱氣相色譜法分析測定藥品中殘留溶媒

          鄧  青                              鄧  嵐    

（云南省分析測試研究所 昆明 650051）        （云南大學微生物研究所 昆明 650091）

摘要  目的：建立一種快速測定藥品中殘留溶媒的分析方法。方法：采用自動頂空取樣，氣相色譜毛細管柱分離，內標與外標相結合的方法分析測定藥品中常見的五種殘留溶媒（甲醇、丙酮、二氯甲烷、苯、甲苯）。結果：分析測定回收率為99.37～101.04%。變異系數為1.75～2.36%。結論：頂空毛細管柱氣相色譜法快速、簡便、準確是測定藥品中殘留溶媒較為理想的方法。

關鍵詞：頂空進樣，毛細管柱氣相色譜，定量測定，藥品，殘留溶媒 

    藥品中殘留溶媒是指在合成原料藥，輔料或制劑生產的過程中使用或產生的揮發性有機化學物質。它們在實際的生產中未能被*地清除。近年來，藥品中殘留有機溶劑的毒性和致癌作用日益引起各方面的重視。藥品中殘留有機溶劑于1997年被美國FDA列為藥品監控項目。我國藥品中殘留有機溶劑檢測也越來越受到有關方面的重視［1］。為適應我國醫藥工業隨著WTO進入市場的需要，提高藥品的使用安全性，開展和完善藥品中殘留有機溶劑檢測工作勢在必行。本文初步研究探索采用頂空毛細管柱氣相色譜法分析藥品中殘留揮發性有機溶劑。頂空氣相色譜法只將揮發和半揮發的組份引入柱子，可避免非揮發性的物質對系統的污染，樣品前處理簡便，分析效率高。結果表明，本方法快速、準確、重現性好。

1 實 驗 部 分

1.1  分析設備及條件  

美國PE-8700氣相色譜儀；FID檢測器；美國PE 公司HS-6B頂空進樣器；澳大利亞SGE公司SE-54彈性石英毛細管柱，內徑0.32mm，長30米，膜厚1.0μm；本文實驗使用的頂空進樣器采用壓力平衡進樣原理，進樣量采用時間開關連續調節，研究摸索的分析參數條件如表一：

1.2  化學試劑及溶液配制  

樣品分析溶劑DMF（N·N一二甲基甲酰胺）， 分析殘留溶媒組分（甲醇、丙酮、二氯甲烷、苯、甲苯）及內標正丙醇均為分析純試劑。

內標溶液：準確移取50.0μl正丙醇于100ml容量瓶中，用DMF定容。

標準儲備溶液：準確移取甲醇、丙酮、二氯甲烷各50.0μl，苯、甲苯各30.0μl于100ml容量瓶中用DMF定容。

標準溶液：取標準儲備溶液0，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0ml內標溶液各5.0μl于25.0ml容量瓶中用DMF定容。分別取2.0ml于頂空瓶內密封，備GC分析用。

樣品溶液： 準確稱取樣品1.500g于25.0ml容量瓶中，加入5.0ml內標溶液, 用

DMF定容。取2.0ml于頂空瓶內密封，備GC分析。

表1:氣相色譜和頂空進樣器條件

Table 1: gas chromatographic and headspace autosampler  conditions

1.3  系統適應性測試   

頂空氣相色譜法分析要研究摸索兩部分：頂空和氣相色譜的分析條件參數，除常規毛細管柱氣相色譜分析所需要的各種條件參數，頂空條件參數研究涉及樣品溶劑極性、沸點、頂空平衡溫度、平衡時間、頂空取樣量等因素的影響［2］。分析結果的準確度，靈敏度和精密度與各個條件參數的選擇均有關。因此系統適應性測試［3］，是頂空氣相色譜分析方法研究中的不可少的部份。它可以核查頂空氣相色譜系統的分析結果是否穩定可靠。按本文研究選擇的條件參數進行分析，由譜圖可測出，任何兩個組份的分離度R值都大于1.5。從六次隨機的進樣獲取的各檢測組分的保留時間見表二, 其相對標準偏差小于2.0%。測試結果表明本分析方法滿足此藥品中揮發性殘留有機溶劑分析的系統適應性要求。

表2：揮發性有機溶劑組份保留時間、相對標準偏差及沸點，（n=6）

Tab 1:  residual organic volatile dissolution media 

（RT：retention time， RSD：relative standard deviation， BP：boiling point）

2   結 果 與 討 論

2.1  采用上述條件頂空進樣分析測定藥品中的殘留揮發性有機溶劑氣相色譜結果，見譜圖一。

圖1：藥品中殘留溶媒氣相色譜圖

Fig.1: Gas chromatogram of residual dissolution media in pharmaceuticals

2.2  精密度及回收率測試見表三。由分析結果可以得出，采用內標與外標結合的方法定量，避免分析中殘留有機溶劑揮發量難以控制的問題，分析結果顯示頂空進樣毛細管氣相色譜是一種簡便、快速（色譜分析僅13min）、準確、重現性好的分析藥品中揮發性殘留有機溶劑的方法。

表3 ：  樣品測定及精密度和回收率測試結果（n=6）

Tab 3 :  Results of samples determination and recoveries:

參考文獻：

１、 李眉  馬玉楠．簡介ICP關于藥品中溶劑殘留量的指導原則．藥學進展，1998，1（3）：119-120

２、 林炳承 等. HS-6B頂空進樣器的性能考察及其應用. 分析測試通報，1991，10（5）：17-21

３、 USP.  X X Ⅲ.  （1995）

Determination of Residual Dissolution Media in Pharmaceuticals by Headspace Capillary Gas Chromatography

Deng      Qing

Yunnan Province Analytic and Testing Research Institute, Kunming, 650051

Deng      Lang

Yunnan University Yunnan Institute of Microbiology, Kunming 650091

Abstract  Objective : To establish the method for determination of residual organic volatile dissolution media in pharmaceuticals. Method: Headspace capillary gas chromatography only introduces volatile and semi-volatile components onto the column, which prevents contamination of the system with non-volatile material. Sample pretreatment is simplified. Analysis efficiency is enhanced. In the present work, headspace injection, capillary analyst and determination by the internal standard and the external standard method was employed together. Results: The recovery  were 99.37─101.04% and the relative  standard  deviations were 1.75─2.36%. Conclusions: This method is fast, reproducible and accurate. Therefore, the automatic headspace gas chromatographic is an ideal approach for the analysis determination of residual dissolution media in pharmaceuticals.

Keywords: Headspace GC,  quantitative analysis,  pharmaceuticals,  residual dissolution media