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凝膠滲透色譜，也稱為尺寸排阻色譜，是一種用于分離和分析高分子化合物(如聚合物)的分子量分布的液相色譜技術。在使用凝膠滲透色譜時，需要注意以下事項以確保實驗的準確性和重現性：
1. 樣品準備：
- 確保樣品充分溶解在流動相中，不溶或部分溶解的樣品會影響色譜峰的形狀和位置。
- 使用適當的溶劑對樣品進行過濾或離心，以去除可能存在的大顆粒或聚集體，這些雜質可能會堵塞色譜柱。
- 根據需要對樣品進行稀釋，以避免過載和柱污染。
2. 色譜柱的選擇和維護：
- 根據樣品的分子量范圍選擇合適的色譜柱，不同的柱具有不同的分離范圍。
- 定期清洗和再生色譜柱，以去除吸附的雜質和恢復柱效。
- 避免柱干涸，因為這會損壞固定相并影響分離效果。
3. 流動相的選擇：
- 選擇與樣品兼容且不會對檢測器產生干擾的流動相。
- 確保流動相純凈無雜質，以防止額外的色譜峰出現。
- 使用前對流動相進行脫氣處理，以減少氣泡對流速和檢測的影響。
4. 系統溫度的控制：
- 保持恒定的柱溫，因為溫度波動會影響樣品的擴散系數和相互作用，從而影響分離效果。
- 對于某些聚合物，可能需要控制較高的溫度以確保其充分溶解。
5. 檢測器的校準：
- 定期校準檢測器，以確保測量結果的準確性。
- 如果使用折射率檢測器，需要確保流動相與樣品有足夠的折光指數差異。
6. 標準品的使用：
- 使用已知分子量的標準品進行系統校準，以建立可靠的校正曲線。
- 標準品應與被測樣品具有相似的化學結構和溶解行為。
7. 數據解析：
- 使用專業的軟件進行數據分析，正確解讀色譜圖和分子量分布。
- 注意基線的穩定性，基線的漂移可能會導致分子量分布的誤判。
8. 操作技巧：
- 在啟動色譜系統之前，確保所有連接都緊固無漏，以防止流動相泄漏。
- 避免快速改變流速或壓力，這可能會導致柱內填料的不穩定。
9. 安全措施：
- 使用有機溶劑作為流動相時，應注意通風和防火安全。
- 遵守實驗室的安全規程，佩戴適當的個人防護裝備。
10. 實驗記錄：
- 詳細記錄實驗條件、樣品信息、操作步驟等，以便于實驗結果的復現和問題的追蹤。
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