BUNSEN資訊| 牛血清的介紹和概述
牛血清是動物血清中的一種,是細胞培養中重要的天然培養基,含有豐富的細胞生長必須的營養成份,也是一種常用的生物化學試劑,有著廣泛的應用。由于牛本身是大型動物,在研究上具有操作便捷性,收獲效率高等優點,故牛血清行業應用非常普遍。
牛血清常分為胎牛血清,新生牛血清,小牛血清,成牛血清。
牛血清通常含有一定比例的蛋白質、糖類、礦物質和維生素;而成牛血清常被用作酸堿調節劑、細胞穩定性外源調節劑和促進修復和重組等。
【胎牛血清】(Foetal Bovine Serum,簡稱FBS):是采自5-8個月胎齡牛胚胎中的胎血。此時胎牛各臟器正處生長分化階段,血中含有豐富的生長發育因子,非常適合各種細胞的培養,一旦胚胎發育這些因子自動消失。因此8個月胎齡以上的牛胚胎,已接近足月,不能作為胎牛血清的原料來使用。
【新生牛血清】(Newborn Calf Serum,簡稱NBCS):0—7天內(也有說法是0—30天內);
【小牛血清】(Calf Serum):采自出生30天至1年的小牛。
【成牛血清】(Adult Bovine Serum,簡稱ABS):采自成年牛收全血后分離得到血清。
怎樣篩選合適的胎牛血清是細胞培養中一個非常關鍵的步驟,首先,將產品測定其pH值,非常重要,要保持在7.4至7.6的pH范圍內;接下來,要檢查有效成分, 檢查其中的細胞因子、培養基添加劑和免疫抑制因子的質量水平;最后,細胞存活率的測定也很重要,由于內毒素直接參與細胞凋亡,對細胞培養結果影響較大,且不同批次的血清,內毒素差異又不易控制,牛血清的質量越高,細胞的生存率和能力也越高,可以替代部分試劑中添加的有機物。
內毒素含量越低,級別越高,以胎牛血清為例:
血清中內毒素含量≤10EU/ml時,此血清為特級胎牛血清;
血清中內毒素含量﹥10EU/ml,≤ 25EU/ml時,此血清為優級胎牛血清;
血清中內毒素含量≥ 25EU/ml時,此血清為標準級胎牛血清;
胎牛血清在細胞培養中的作用:
1.提供對維持細胞指數生長的激素,基礎培養基中沒有或量很少的營養物,以及主要的低分子營養物。
2.提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結合或調節它們所結合的物質活力。
3.有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到解毒作用。
4.是細胞貼壁、鋪展在塑料培養基質上所需因子來源。
5.起酸堿度緩沖液作用。
6.提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。
7.參與細胞凍存。
在細胞培養中,胎牛血清加入基礎培養基的濃度大多為5%~20%(最常見為10%)的。具體到不同試驗,應依據文獻報導,或細胞類型或基礎培養基的成分來確定相應濃度。胎牛血清應在-20℃儲存,運輸應干冰冷鏈運輸,避免反復凍融,確保血清中因子活性不受影響,保證血清優良品質
儲存條件:-20°C凍存。
胎牛血清解凍后,應按單次習慣用量分裝,分裝后的血清仍-20°C凍存。
若置于4°C的血清,應在一周內用完,用量頻率少推薦使用EvaCell免分裝50ml的規格哦
血清和培養基的配制,應遵循“現用現配”原則,保證更好的細胞培養效果。配好的培養液,應于一周內用完。
血清避免反復凍融,避免在4°C或更高溫度儲存過久,否則會破壞血清中有效活性成分和被污染,影響血清品質。
血清融化注意:
在水浴過程中,血清的平面要浸在水中。在融化過程中要慢慢搖動瓶身,使血清混勻,但搖動中盡量不要產生泡沫!
胎牛血清使用說明:血清從-20℃取出后,融化,按推薦體積加入到基礎培養基中,混勻,制備成新鮮培養基(整個操作需在無菌超凈臺中進行,注意無菌操作)。配制好的培養基推薦在4℃保存,應在1周內用完。
關于熱滅活:胎牛血清不推薦熱滅活。
熱滅活一般是指在做免疫相關的試驗中,通過加熱滅活掉血清中的補體,以避免對免疫試驗的影響。
在胎牛血清中,由于胎齡原因,尚未形成完整的補體系統,因此,胎牛血清不會真正干預免疫試驗。故不需滅活。
并且,熱滅活反而可能導致胎牛血清中部分重要的生長因子的活性衰減,進而影響細胞培養效果。
若針對某些特殊試驗,對于胎牛血清一定要做熱滅活,國際上推薦熱滅活的方法:40℃水浴,20min。
BUNSEN本生胎牛血清優勢:
1 全球有的血清來源,批次穩定
2 提供細胞培養服務,專業老師指導,養細胞更放心。
3 新批次在試用前,提供試用服務,養細胞更放心
4 千萬個血清用戶細胞培養經驗,為各種細胞培養提供問題梳理分析,解決方案
5 售后無憂,從簽收日開始計算,有效期1年,血清在妥善保管、未開封未融化、且不影響二次銷售的情況下,均可享受無條件退貨或換貨的售后保障。
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