反相色譜柱的平衡方法
聚合物基質的反相色譜柱采用了聚甲基丙烯酸酯聚合物,制備而成具有不同孔徑和粒徑大小的各種規格的產品。TSKgel 聚合物基質反相色譜柱適用于較寬的pH范圍,即使在高pH下也具有很好的重復性。這類色譜柱在pH2-12下表現出極其穩定的化學特性。因此,在硅膠基質色譜柱適用受限的堿性pH下仍然可以使用。
反相色譜柱載經過出廠測試后是保存在乙腈-水中的;由于色譜柱在儲存或運輸過程中固定相可能會干擾,這會引起鍵合相的空間結構發生變化,因此,新的色譜柱在用來分析樣品之前,請一定要充分平衡色譜柱。
反相色譜柱的平衡方法是:以純乙腈或甲醇作為流動相,首先用低流速0.2ml/min將色譜柱平衡過夜(請注意斷開液相色譜儀檢測器)。
然后,將流速增加到0.8ml/min沖洗30min以便將色譜柱的填料充分平衡至好的狀態。平衡過程中,將流速緩慢地提高至獲得穩定的基線,這樣可以保證色譜柱的使用壽命,并保證在以后的使用中,獲得分析結果的重現性。
請一定確保所使用的流動相和乙腈一水互溶。如果您所使用的流動相中含有緩沖鹽,應注意首先用20倍柱體積的5%的乙腈一水流動相過渡,然后使用分析樣品的流動相直至獲得穩定的基線。
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