誘導多能干細胞克隆效率低?單細胞分選系統幫您搞定,分離效率高達100%!
人類誘導多能干細胞(hiPSCs)是一類可用于疾病建模、藥物開發和組織工程領域的多能誘導干細胞。與CRISPR-Cas9等功能強大的基因編輯技術結合后,可根據不同患者的特性進行疾病相關遺傳變異的研究和識別。
然而,培養hiPSCs的步驟較為繁瑣,細胞對異常的處理和操作非常敏感,任何操作的問題都有可能導致細胞和遺傳毒性應激的積累,進而導致不良分化和多能性喪失。基因編輯建立單細胞衍生的hiPSC克隆過程中常用的技術往往過于復雜或粗暴,導致單細胞克隆效率低下。此外,它們在確保衍生培養物單克隆性方面存在局限性。為此,英國iotaSciences公司推出了可實現100%單細胞分離的isoPick單細胞可視化分選系統,有效解決了培養hiPSCs單克隆過程中的困難。
如右上圖所示,單細胞可視化分選系統isoPick采用納升級的網格式單細胞腔室技術(GRID技術),可實現高通量、高自動化的單細胞可視化分選;確保分選所得的單細胞樣品中只有一個單細胞,結果可驗證、可追蹤;分選過程非常溫和,能夠確保更高的單細胞存活率,達到更佳的克隆生長效果。單細胞可視化分選系統isoPick可全自動進行單細胞的分選、拾取并轉移1.5 µl至200 µl的液體至PCR管或96孔板中。
使用isoPick從GRIDs內分選hiPSC單細胞置于Laminin-521,Vitronectin-N, Synthemax和iMatrix (Laminin-511)4種不同基質且含有培養基的96孔板中。以第7-10天內的時間計算得出的單細胞克隆效率可以發現,無論使用的包被基質或hiPSC細胞系,平均克隆效率均>70%(上圖),明顯高于其他通常使用的方法(包括FACS),表明isoPick對敏感單細胞的溫和處理,能夠確保細胞的高存活率和更好的克隆生長效果。
isoPick使用戶能夠以快速、高效、自動化的方式從多樣、異質的細胞群體中分離單個細胞。GRID腔室非常適合用于觀察和記錄單個細胞的分離過程。 用戶可將單個細胞分離并直接置入96孔板用于細胞克隆。相比傳統方法,這種方法用簡單的線性工作流程,顯著提高了細胞分離與克隆效率,操作流程高度自動化,可以將樣品無縫銜接單細胞組學的后續操作。
單細胞可視化分選系統的優勢:
● 全自動化流程
● 操作非常簡單 對細胞無損傷
● 結果可追蹤
● 分離效率高達100%
● 直接轉移到PCR管或96孔板
● 結構緊湊,體積小巧
文獻舉例:
單細胞可視化分選系統相關文獻發表于Cell、Advanced Science、Small Methods、Nature Communications 等期刊,如下摘引了近年三篇具有代表性的文獻和大家分享。
● Soitu C, Stovall‐Kurtz N, Deroy C, et al. Jet‐Printing Microfluidic Devices on Demand[J]. Advanced Science, 2020, 7(23): 2001854.
● Gangoso E, Southgate B, Bradley L, et al. Glioblastomas acquire myeloid-affiliated transcriptional programs via epigenetic immunoediting to elicit immune evasion[J]. Cell, 2021, 184(9): 2454-2470. e26.
● Deroy C, Nebuloni F, Cook P R, et al. Microfluidics on Standard Petri Dishes for Bioscientists[J]. Small Methods, 2021, 5(11): 2100724.
● Deroy C, Wheeler J H R, Rumianek A N, et al. Reconfigurable microfluidic circuits for isolating and retrieving cells of interest[J]. ACS Applied Materials & Interfaces, 2022, 14(22): 25209-25219.
● Oliveira N M, Wheeler J H R, Deroy C, et al. Suicidal chemotaxis in bacteria[J]. Nature Communications, 2022, 13(1): 7608.
樣機體驗:
為更好地服務中國科研工作者,Quantum Design 中國引進了單細胞可視化分選系統-isoPick樣機,將為大家提供為專業的售前、銷售、售后技術支持,歡迎各位老師參觀試用!
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