基于熒光的檢測方法在生命科學(xué)研究中應(yīng)用廣泛。市面上有多種試劑盒和試劑可用于熒光酶標(biāo)儀所涵蓋的各種檢測類型。

常見熒光檢測應(yīng)用包括DNA/RNA定量、鈣測定、酶活性、基因表達(dá)、GPCR的第二信使信號、細(xì)胞凋亡測定、細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)染效率、細(xì)胞毒性等。

如果您正在選購一臺熒光酶標(biāo)儀，各種規(guī)格、選項和功能也許會讓您挑花了眼。為此，我們總結(jié)了7個最重要的關(guān)注點，讓我們?yōu)槟灰坏纴怼?/p>

1/靈敏度

毋庸置疑，靈敏度更高的酶標(biāo)儀能夠提供更好的數(shù)據(jù)和統(tǒng)計結(jié)果，重復(fù)樣本之間的差異更小，有反應(yīng)和無反應(yīng)樣本之間的距離（assay window）更大。更高的靈敏度還有助于減少試劑和樣品的用量，使檢測更加精簡的同時，生成高質(zhì)量的結(jié)果。這將有效降低每個樣品的檢測成本

2/動態(tài)范圍

在熒光強度檢測中，樣品的濃度范圍通常較大。在熒光酶標(biāo)儀上測量的信號可能會跨越從極弱到強的范圍。還有，基于酶或細(xì)胞動力學(xué)檢測的樣品通常很難預(yù)測其信號強度，因為在動力學(xué)檢測過程中，最大信號會隨著時間而累積。

在這些情況下，可能很難在一次測量中用一種設(shè)置獲取所有樣品的信號。信號強度高的樣品可能會使酶標(biāo)儀的熒光檢測器飽和；信號強度低的樣品可能無法與空白樣品區(qū)分開來。

如果熒光酶標(biāo)儀支持較大的動態(tài)范圍，可在單次運行中讀取差異很大的樣品，避免試出正確的稀釋倍數(shù)和熒光增益比率所造成的試劑和時間浪費。BMG LABTECH的 CLARIOstar® Plus和VANTAstar® 酶標(biāo)儀配備的動態(tài)范圍擴展技術(shù)(EDR)提供具有競爭力的動態(tài)范圍（8個數(shù)量級濃度），可在單次運行中自動測量極弱和強的信號，無需進(jìn)行調(diào)節(jié)。

3/波長選擇

激發(fā)和發(fā)射波長是任何熒光檢測的必要參數(shù)。選擇合適的波長可降低通常由樣品和微孔板的光散射或自發(fā)熒光引起的非特異性背景或干擾。

4/兼容的微孔板規(guī)格

在生命科學(xué)研究中，進(jìn)行基礎(chǔ)的熒光測定一般使用黑色96孔微孔板。但如果您有多種樣品，并希望節(jié)約寶貴的試劑或時間，也可以使用384孔和1536孔板。只需確保您選擇的熒光酶標(biāo)儀也能兼容您計劃使用的微孔板規(guī)格。還有一點，吸光、熒光和化學(xué)發(fā)光檢測需要不同顏色的微孔板，分別為透明、黑色和白色

5/試劑注入裝置

在選購熒光酶標(biāo)儀時，還應(yīng)考慮分析應(yīng)用的性質(zhì)。對于酶動力學(xué)檢測或基于細(xì)胞實時反應(yīng)的檢測，試劑注入器能派上大用場。手動將試劑移入孔中有可能導(dǎo)致反應(yīng)的重要數(shù)據(jù)丟失。特別是對于一些快速反應(yīng)，可能還沒來得及檢測，您所尋找的信號就已經(jīng)消失了。我們的熒光酶標(biāo)儀配備了試劑注入器，注射和信號檢測同時在一個孔中進(jìn)行，然后在下一個孔繼續(xù)進(jìn)行（圖 5）。這樣一來，即使是快速反應(yīng)，您也不會錯過任何數(shù)據(jù)點。

6/環(huán)境控制

如果您需要進(jìn)行基于活細(xì)胞的測定，又想避免在熒光酶標(biāo)儀和培養(yǎng)箱之間來回移動微孔板，請確保您選擇的酶標(biāo)儀具有控制其內(nèi)部氣體環(huán)境和溫度的功能。

BMG LABTECH酶標(biāo)儀可集成大氣控制單元（ACU，圖 6）。ACU可獨立調(diào)節(jié)酶標(biāo)儀倉內(nèi)的氧氣和二氧化碳含量，為活細(xì)胞檢測應(yīng)用提供理想的環(huán)境。與振蕩和恒溫孵育功能相結(jié)合，ACU為基于細(xì)胞的檢測（從標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞生長到缺氧檢測等）提供了真正不用操心的“甩手”解決方案。

7/數(shù)據(jù)分析軟件

酶標(biāo)儀的軟件是容易被低估的選購要點。有些酶標(biāo)儀軟件只能控制測定過程并提供原始檢測數(shù)據(jù)輸出，也有些軟件可以進(jìn)行復(fù)雜的分析。

一款全面、易用、靈活的軟件是您的得力助手，可簡化檢測和數(shù)據(jù)分析過程，使儀器發(fā)揮應(yīng)有的作用。

熒光檢測中的計算功能包括自動扣除空白，以及根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線自動計算濃度、Km和Vmax等酶常數(shù)。

對于常見的測定應(yīng)用，BMG LABTECH軟件包提供預(yù)設(shè)的快速測定專用方案和專用分析模板。通過這些專用解決方案，只需單擊鼠標(biāo)即可采集和分析數(shù)據(jù)，使研究人員能夠快速、輕松地進(jìn)行實驗（圖 7）。