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HPLC色譜柱是設計用于為 HPLC 和 UHPLC 應用提供可靠且可重現結果的色譜柱。產品在多種相中操作，有多種固定相和色譜柱尺寸可供選擇。包括分析、防護、阱和制備色譜柱。
色譜柱的柱效是非常重要的指標，一般都取決于固定相的性能和裝柱技術。一般HPLC的色譜柱固定相(填料)大致有三種：硅膠或以硅膠為基質質的填料、聚合物填料和無機物填料。正相色譜柱大多采用硅膠類填料，反相色譜柱則多采用以硅膠為基質組成的官能團類的填料。以聚合物為填料的色譜柱最大的特點是pH在1～14都能用；疏水性強。但無機填料色譜柱一般只是限于特殊用途，比較少用。
因為HPLC的樣品都為溶液，而溶液受溫度影響很大。例如：溫度對溶劑的溶解能力、色譜柱的柱效、流動相的黏度都會產生影響；如果溫度升高，可能會提高溶液在流動相中的溶解度，可以降低分配系數K；降低流動相黏度可以降低柱壓，有利于保護色譜柱，延長色譜柱的壽命。但是，溫度不能太高，否則會產生氣泡。
HPLC工作者還必須注意不同的溫度，對色譜柱的保留時間、分離效果會有影響；對檢測器的靈敏度也會有影響。特別是對示差折光器的靈敏度、最小檢出限的影響很大。所以，很多HPLC特別注意對恒溫系統的設計。這些都是HPLC設計者、使用者應該重視的問題。
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