? 1 非洲豬瘟簡介
非洲豬瘟(英文名稱:African Swine fever,簡稱:ASF)是由非洲豬瘟病毒(英文名稱:African Swine fever virus,簡稱:ASFV)感染家豬和各種野豬(如非洲野豬、歐洲野豬等)引起一種急性、出血性、烈性傳染病。非洲豬瘟病毒是非洲豬瘟科非洲豬瘟病毒屬的重要成員,病毒有些特性類似虹彩病毒科和痘病毒科。病毒粒子的直徑為175-215納米,呈20面體對稱,有囊膜?;蚪M為雙股線狀DNA,大小170-190kb。在豬體內,非洲豬瘟病毒可在幾種類型的細胞漿中,尤其是網狀內皮細胞和單核巨噬細胞中復制。該病毒可在鈍緣蜱中增殖,并使其成為主要的傳播媒介。世界動物衛生組織(OIE)將其列為法定報告動物疫病,該病也是我國重點防范的一類動物疫情。
? 2 非洲豬瘟在我國的發病情況
自2018年8月3日我國確診非洲豬瘟疫情以來,我國已經在遼寧、安徽、黑龍江、海南等地接連爆發非洲豬瘟疫情。盡管非洲豬瘟傳入我國僅幾年的時間,但已經在多地接連爆發,造成了巨大的經濟損失,而且非洲豬瘟臨床癥狀與豬瘟癥狀相似,只能依靠實驗室監測確診。在目前的情況下,急需一種能對非洲豬瘟進行快速檢測的方案!
? 3 非洲豬瘟病毒(ASFV)實時等溫擴增儀配置清單
項目 | 序號 | 物品名稱 | 型號規格 | 單位 | 數量 | 備注 |
主 機 箱 | 1. | 儀器主機 | HW-ZW16 | 臺 | 1 | |
2. | 儀器使用說明書 | 個 | 1 | |||
3. | 合格證/保修卡 | 本 | 2 | |||
4. | 儀器電源線 | 根 | 1 | |||
5. | 鋁合金箱 | 個 | 1 | |||
配 件 箱 | 6. | 電子天平 | 0-500g | 臺 | 1 | |
7. | 樣品杯 | 50mL | 個 | 24 | ||
8. | 移液槍 | 1-5ml | 把 | 1 | ||
9. | 移液槍槍頭 | 1-5ml | 包 | 1 | ||
10. | 移液槍 | 100μL-1000μL | 把 | 1 | ||
11. | 移液槍槍頭 | 100μL-1000μL | 包 | 1 | ||
12. | 移液槍 | 10μL-100μL | 把 | 1 | ||
13. | 移液槍槍頭 | 10μL-100μL | 包 | 1 | ||
14. | 移液槍 | 2μL-20μL | 把 | 1 | ||
15. | 移液槍槍頭 | 2μL-20μL | 包 | 1 | ||
16. | 剪刀 | 把 | 1 | |||
17. | 鑷子 | 把 | 1 | |||
18. | 研缽 | 直徑8cm | 個 | 1 | ||
19. | 離心機 | 大龍D1008 | 臺 | 1 | ||
20. | 離心管 | 1.5mL | 個 | 50 | ||
21. | PCR管 | 0.2mL | 個 | 50 | ||
22. | 非洲豬瘟病毒熒光等溫擴增檢測試劑 | 48T/盒 | 盒 | 5 | ||
重 要 配 件 | 23. | 漩渦混勻器 | 臺 | 1 | ||
24. | 畜牧恒溫箱 | -10℃~65℃ | 臺 | 1 | ||
25. | 高速冷凍離心機 | LC-LX-HR165A | 臺 | 1 | ||
26. | 研磨儀 | 臺 | 1 | |||
27. | 移液器(5種型號) | 支 | 10 | |||
28. | 冰箱 | 臺 | 1 |
? 4 非洲豬瘟病毒(ASFV)實時等溫擴增儀技術參數
儀器型號 | HW-ZW16 |
樣品通量 | 16x0.2ml,兼容單管和8聯管 |
加熱方式 | 半導體制冷片結合電性電阻熱紅外技術 |
溫控范圍 | 室溫~85℃ |
溫控精度 | ±0.1℃ |
溫度均一性 | ±0.15℃ |
激發光波長 | 第一通道:470nm±10nm |
檢測光波長 | 第一通道:520nm±10nm |
激發光 | 高亮度LED |
檢測器 | 新型光學檢測器,結合數字電路控制,光信號穩定 |
熒光傳導方式 | 太空專用光纖傳導 |
結果判讀方式 | 根據擴增曲線軟件自動判讀陰陽性 |
結果顯示 | 可在機器顯示擴增曲線及出峰時間 |
檢測時間 | ≤40分鐘 |
檢測試劑 | 開放式恒溫熒光檢測試劑 |
操作軟件 | 自帶軟件 |
控制方式 | 觸屏控制 |
檢測項目 | 可同時最多檢測16個項目 |
檢測靈敏度 | 10~109拷貝/反應,且樣品間無交叉污染 |
儀器分析功能 | 根據所檢測樣品,直接分析判定陽性或陰性;也可通過標準品進行絕對定量 |
軟件設置功能 | 可選擇反應程序;可對反應程序進行設置,如可設置反應時間、可在反應過程中修改反應時間(縮短或延長)、可設置不同溫度,每個溫度檔位差為0.1℃;可將反應程序保存為模板;可對不同孔進行重命名;可設置掃描間隔時間,范圍為 18~60S,默認間隔為 60S;可設置陰陽性判斷閾值;閾值線可上下拉動等 |
工作環境溫度 | 18~35℃ |
儲存溫度 | -20℃~55℃ |
環境相對濕度 | ≤85% |
工作電壓 | 100~240V,50~60Hz |
? 5 非洲豬瘟病毒熒光等溫擴增檢測試劑盒技術參數
作用與用途:用于血液、血球粉、淋巴結、脾臟、扁桃體以及豬肉產品中非洲豬瘟病毒核酸的檢測。
1.規格:48次/盒;
2.保存條件:-20℃保存;
3.組成:熒光等溫擴增免提取反應液:1100ul;Bst DNA聚合酶:75ul;陰性對照:1000ul;陽性對照:200ul;礦物油:1000ul;說明書:1份;
4.有效期:12個月;
5.本試劑盒適用于便攜式熒光定量PCR儀檢測箱及各種其他型號熒光定量PCR儀;
6.反應體系:25ul;反應時間:1h;報告基團:FAM;淬滅基團:None;
7.結果判定:有明確判定標準,被檢樣品熒光信號有指數型增長,陽性對照Tt值≤45并出現典型的擴增曲線,陰性對照無Tt值并且無擴增曲線即S型擴增曲線,結果成立;被檢樣品Tt值≤45并出現典型的擴增曲線為陽性;被檢樣品無Tt值并且無典型擴增曲線為陰性;被檢樣品Tt值在45-60之間并出現典型的擴增曲線為可疑。對于可疑結果應重新檢測,如果樣品FAM通道仍有典型S型擴增曲線且Tt值≤60,則判定為陽性,否則為陰性;
8.本試劑盒經中國動物疫病預防控制中心評價,診斷敏感性100%,特異性100%;
9.該產品為疫控(診)【2019】74號文件中推薦的產品;
10. 產品生產廠家具有分子生物學類診斷制品GMP車間。
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