培養(yǎng)箱必須先經(jīng)過(guò)清潔才能實(shí)現(xiàn)消毒和滅菌的目的，許多殺菌劑只對(duì)經(jīng)過(guò)清潔過(guò)的物品才具有殺菌活性。清潔時(shí)必須使用與以后使用的消毒劑或殺菌劑化學(xué)性質(zhì)上相容的試劑進(jìn)行清潔、消毒。
　　①清潔箱體表面：先拂去表面的灰塵，再用濕的海綿或軟布清洗，再用軟布擦干。如果有污物則用低濃度的清潔劑清洗，然后擦干。
　　②清洗箱體內(nèi)部：選擇合適的消毒劑。所有的物件和表面必須清洗，然后用無(wú)菌水沖洗，再擦干或晾干。
　　③清洗玻璃門(mén)：清洗箱內(nèi)的玻璃門(mén)時(shí)使用的清潔劑和清洗培養(yǎng)箱內(nèi)部時(shí)使用的相同。然后用蒸餾水漂洗，從而清除殘留的清潔劑，最后用軟布把門(mén)擦干。
　　二氧化碳培養(yǎng)箱的消毒和滅菌
　　消毒是指殺死微生物的物理或化學(xué)手段，但不一定殺死其孢子。滅菌是指殺死所有微生物，當(dāng)培養(yǎng)箱內(nèi)細(xì)胞受到污染時(shí)則需要采取滅菌措施。一般，在培養(yǎng)箱內(nèi)細(xì)胞沒(méi)有污染的情況下平均1-3個(gè)月消毒一次。的3種消毒滅菌的方式是：液體消毒劑、紫外和加熱。
　　①液體消毒劑：選擇對(duì)培養(yǎng)箱無(wú)腐蝕性的液體消毒劑，并且液體消毒劑的消毒效果好壞和很多因素有關(guān)。比如：場(chǎng)所的溫度、接觸時(shí)間、pH、穿透能力、有機(jī)物的反應(yīng)。這些因素中的一些很小的變化可能會(huì)造成去污劑的效力上大的不同。因此甚至在很有利的情況下，當(dāng)最終要求必須無(wú)菌時(shí)，液體去污劑也不是可信賴(lài)的去污方法。
　　②紫外消毒：一般先用蒸餾水清洗干凈后，再用培養(yǎng)箱自帶的紫外燈照射一天或者用手提式的紫外燈照射。因被遮擋時(shí)或距離遠(yuǎn)時(shí)都會(huì)削弱紫外滅菌的效果，紫外滅菌方式較為簡(jiǎn)單。
　　③加熱：濕熱和干熱被認(rèn)為是殺菌的方法。在一般環(huán)境下，高壓滅菌器加熱到121℃快速產(chǎn)生蒸汽是的方法，但是二氧化碳培養(yǎng)箱無(wú)法進(jìn)行高溫高壓滅菌，只能退而求其次進(jìn)行90℃濕熱滅菌，但90℃因?yàn)闇囟冗^(guò)低，起不到100℃以上水蒸汽所帶來(lái)的滲透性和高壓力效果，所以滅菌效果也大打折扣.而干熱140℃-180℃，可以起到滅菌的作用。