一、細胞因子的原理:
(1)由免疫細胞(如單核、巨噬細胞、T細胞、B細胞、NK細胞等)和某些非免疫細胞(內皮細胞、表皮細胞、纖維母細胞等)經刺激而合成、分泌的一類具有廣泛生物學活性的小分子蛋白質。
(2)細胞因子一般通過結合相應受體調節細胞生長、分化和效應,調控免疫應答。細胞因子(cytokine,CK)是免疫原、絲裂原或其他刺激劑誘導多種細胞產生的低分子量可溶性蛋白質,具有調節固有免疫和適應性免疫、血細胞生成、細胞生長、APSC多能細胞以及損傷組織修復等多種功能。
(3)細胞因子可被分為白細胞介素、干擾素、腫瘤壞死因子超家族、集落刺激因子、趨化因子、生長因子等。
二、利用大腸桿菌、酵母菌、昆蟲細胞、哺乳動物細胞等工程細胞大規模生產的細胞因子。
三、特點分析:
1.真實性:重組蛋白產品一致經過N末端氨基酸序列分析;必要時應用SDS-PAGE,RP-HPLC和質譜(MS)檢測其真實性。
2.純度:應用SDS-PAGE和RP-HPLC方法分析產品純度。
3.生物活性:進行相應的體外(invitro)或體內(invivo)活性檢測。
4.蛋白含量:通過紫外光譜分析,SDS-PAGE電泳檢測;必要時應用HPLC定量標準蛋白溶液。
5.內毒素:kineticLAL法檢測內毒素。
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