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測量肉類中的脂肪有哪些方式

來源:上海紐邁電子科技有限公司   2023年02月02日 10:41  
  全自動脂肪測定儀不是測量人體脂肪含量的儀器,而是主要用來測定糧食(包括玉米、稻谷)品質判定指標----脂肪酸值的專用設備,同時適用于其他糧食及糧食制品脂肪酸值測定。
  肉及其制品中除游離脂肪外,肌肉組織中還存在一些結合脂類,因此脂肪測定分兩類,即總脂肪(包括結合脂在內)和游離脂肪。
  1、氯仿-甲醇提取法
  1)原理:將試樣分散于氯仿-甲醇混合液中,于水浴上輕微沸騰,氯仿-甲醇混合液與一定的水分形成提取脂類的有效溶劑,在使試樣組織中結合態(tài)脂類游離出來的同時增大了與磷脂等極性脂類的親和性,從而有效地提取出全部脂類。再經過濾除去非脂成分,然后回收溶劑,對于殘留脂類要用石油醚提取,定量。
  2)儀器
  ①具塞三角瓶
  ②電熱恒溫水浴鍋:50~100℃
  ③提取裝置
  ④布氏漏斗:11G-3、過濾板直徑40mm,容量60~100ml
  ⑤具塞離心管
  ⑥離心機:3000轉/min
  ⑦組織搗碎機
  3)試劑
  ①氯仿:體積分數(shù)為97%以上
  ②甲醇:體積分數(shù)為96%以上
  ③氯仿-甲醇混合液:按2:1體積比混合
  ④石油醚
  ⑤無水Na2SO4:以120~135℃干燥1~2h
  4)操作方法
  ①提取:準確稱取均勻樣品5g置于具塞三角瓶內(高水分食品可加適量硅藻土使其分散),加入60ml氯仿-乙醇混合液(對于干燥食品,可加入2~3ml水)。連接提取裝置,將其置于65℃水浴中,由輕微沸騰開始,加熱1h進行提取。
  ②回收溶劑:提取結束后,取下燒瓶用布氏漏斗過濾,并且用氯仿-甲醇混合液洗滌濾器、燒瓶及濾器中試樣殘渣,濾液、洗滌液一并收集于具塞三角瓶內,置65~70℃水浴中回收溶劑,至燒瓶內物料呈濃稠狀,而不能使其干涸,然后冷卻。
  ③石油醚萃取、定量:用移液管加入25ml石油醚,然后加入15g無水無水Na2SO4,立即加塞混搖1min,將醚層移入具塞離心沉淀管進行離心分離(3000r/min)5min。用10ml移液管迅速吸取離心管中澄清的石油醚10ml,置于已稱量至恒重的干燥稱量瓶內,蒸發(fā)去除石油醚,于100~105℃烘箱中烘至恒量(約30min)。
  5)結果計算
  6)注意事項
  ①提取結束后先用玻璃過濾器過濾,再用溶劑洗滌燒瓶,每次用5ml洗3次,然后用30ml洗滌殘渣及濾器,洗滌殘渣時可用玻璃棒一邊攪拌試樣殘渣,一邊用溶劑洗滌。
  ②回收溶劑也可利用索氏抽提器,抽脂瓶需事先恒重后,再把提取液移入提脂瓶。
  ③溶劑回收殘留物應具有一定流動性,不能全部干涸,否則脂類難以溶解于石油醚而使測定值偏低。故最好在殘留有適量水分時停止蒸發(fā)。
  4)在用石油醚萃取時,應先加石油醚再加無水無水Na2SO4,以免影響脂肪的溶解。
  2、酸水解法
  1)原理:試樣與稀HCl共同煮沸,試樣中蛋白質及碳水化合物被水解,細胞壁被破壞,游離出包含的和結合的脂類部分,過濾得到的物質,干燥,然后用正己烷或石油醚抽提留在濾器上的脂肪,除去溶劑,即得脂肪總量。
  2)試劑
  ①抽提劑:正己烷或30~60℃沸程的石油醚
  ②2mol/l的HCl溶液
  ③藍色石蕊試紙
  ④玻璃珠
  3)儀器及用具
  ①實驗室常規(guī)儀器和設備
  ②絞肉機:孔徑不超過4mm
  ③索氏抽提器
  4)的制備:取有代表性的試樣至少200g,于絞肉機中使其均質化(至少絞兩次)并混勻,封閉儲存于一盛滿的容器中(防止其腐爛和成分變化),并盡可能提早分析試樣。
  5)操作方法
  ①酸水解:稱取試樣3~5g,精確至0.001g,置于250ml錐形瓶中,加入2mol/LHCl溶液50ml,蓋上小表面皿,于石棉網上用火加熱至沸騰,繼續(xù)用小火煮沸1h并不時振搖,取下,加入熱水150ml,混勻,過濾。錐形瓶和小表面皿用熱水洗凈,一并過濾。沉淀用熱水洗至中性(用藍色石蕊試紙檢驗)。將沉淀與濾紙置于大表面皿上,連同錐形瓶和小表面皿一起于(103±2)℃干燥箱內干燥1h,冷卻。
  ②抽提脂肪:將烘干的濾紙放入襯有脫脂棉的濾紙筒中,用經抽提劑潤濕的脫脂棉擦凈錐形瓶、小表面皿和大表面皿上遺留的脂肪,放入濾紙筒中。將濾紙筒放入索氏抽提器的抽提筒內,連接內裝少量玻璃珠并已干燥至恒重的接受瓶,加入抽提劑至瓶內容積的2/3處,于水浴上加熱,使抽提劑每5~6min回流一次,抽提4h。
  ③稱量:取下接受瓶,回收抽提劑,待瓶中抽提劑剩1~2ml時,在水浴上蒸干,于(103±2)℃干燥箱內干燥30min,置于干燥器內冷卻至室溫,稱量。重復以上烘干、冷卻和稱量過程,直至相繼兩次稱量結果之差不超過試樣質量的0.1%。
  ④抽提程度的驗證:用第二個內裝玻璃珠、已干燥至恒重的接受瓶,用新的抽提劑繼續(xù)抽提1h,增量不得超過試樣質量的0.1%。同一試樣進行兩次測定。
  6)結果計算
  7)允許誤差:由同一分析者同時或相繼進行的兩次測定結果之差不得超過0.5%。
  8)注意事項
  ①放入濾紙筒時高度不要超過回流彎管,否則超過回流彎管以上部分樣品中的脂肪不能提盡造成誤差。
  ②提取時水浴溫度不可過高,回流速度控制在5~6min回流一次為宜。
  ③在抽提時冷卻管上端最好連接一個CaCl2管,這不僅可以防止空氣中水分的進入,還可避免抽提劑的揮發(fā)。若無此裝置,可松松地塞一團干燥的脫脂棉球。
  ④浸出物在烘箱內干燥時間不能過長,因為極不飽和脂肪酸會受熱氧化而增加質量。
  ⑤抽提瓶干燥時,瓶口應側倒放置,使揮發(fā)物易與空氣形成對流,干燥較快。

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