安捷倫熒光分光光度計是一種定性、定量分析的儀器。其能提供包括激發光譜、發射光譜以及熒光強度、量子產率、熒光壽命、熒光偏振等許多物理參數,從各個角度反映了分子的成鍵和結構情況。通過對這些參數的測定,不但可以做一般的定量分析,而且還可以推斷分子在各種環境下的構象變化從而闡明分子結構與功能之間的關系。
安捷倫熒光分光光度計的構造:
1)光源
為了便于選擇激發光的波長,要求激發光源是能夠在很寬的波長范圍內發光的連續光源。在紫外-可見光區,熒光光譜儀的光源常用氙弧燈。
2)樣品池
熒光儀用的樣品池材料要求無熒光發射,通常用熔融石英,樣品池的四壁均光潔透明。對固體樣品,通常將樣品用石英片固定于樣品夾的底部表面,使之與入射光和出射光都成45°夾角放置。
3)單色器
有兩個單色器:激發單色器和發射單色器。單色器一般為光柵和干涉濾光片;濾光片可分為玻璃濾光片、膠膜濾光片和干涉濾光片3種。
4)檢測器
一般為光電管或光電倍增管檢測器,二極管陣列檢測器、電荷耦合器件陣列檢測器以及光子計數器等。
安捷倫熒光分光光度計的特點:
(1)主要特點是靈敏度高、選擇性好,靈敏度要比吸收光譜測量高2-3個數量級。
(2)強選擇性強,熒光物質具有兩種特征光譜:激發光譜和吸收光譜,相對于分光光度法單一的吸收光譜來說,熒光光譜可根據激發光譜和發射光譜來鑒定物質。
(3)信息量豐富,能提供熒光物質的多種參數。
(4)但是熒光分析方法也有其不足之處:①很多物質本身不發熒光;②熒光的產生與化合物結構的關系不明確;③干擾因素多,光分解、氧淬滅、易污染。
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