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手性色譜柱是將具有光學活性的單體固定在硅膠或其它聚合物上所制成手性固定相。通過引入手性環境使對映異構體間呈現物理特征的差異，從而達到光學異構體拆分的目的。要實現手性識別，手性化合物分子與手性固定相之間至少存在三種相互作用。這種相互作用包括氫鍵、偶級-偶級作用、π-π作用、靜電作用、疏水作用或空間作用。手性分離效果是多種相互作用共同作用的結果。這些相互作用通過影響包埋復合物的形成，特殊位點與分析物的鍵合等而改變手性分離結果。由于這種作用力較微弱，因此需要仔細調節、優化流動相和溫度以達到好的分離效果。
在使用手性色譜柱的過程中要避免壓力和溫度的急劇變化，在進閥出閥的轉動不能過緩，了解關于使用的一些相對性環境，選擇使用適宜流動相才能避免定向的破壞，避免將機制復雜的樣品摻入到生物樣品中進行使用，要保護產品的使用模式，了解每次使用的方法。
當使用手性色譜柱出現壓力高的原因可能是流動相中醇含量過高，或液相流路堵塞，或柱頭有樣品沉淀，或填料被壓縮柱頭塌陷。根據不同原因，請采取相應措施。如果流動相中醇含量過高，則需要升溫或降低流速。如果液相流路中有堵塞，則需要排除堵塞。如果柱頭有樣品沉淀，則需要使用流動相溶解樣品和樣品預處理來去除樣品中的易沉淀成分。如果填料被壓縮柱頭塌陷，則需要重新購買新的手性柱。
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