血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等,這些物質(zhì)對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。
胎牛血清是母牛在懷孕五至八月齡胎時,將胎牛取出并進行心臟穿刺取血。穿刺取血可很大程度的避免外界的污染。而新生牛血清是從剛出生到2周內(nèi)的新生牛靜脈采血。和新生牛血清相比,胎牛血清顯然產(chǎn)量低,成本高。
應如何為你的細胞選購FBS呢?選購FBS應考慮哪些標準?
1、血源可追溯性
選擇來源安全、可追溯的FBS對于細胞培養(yǎng)來說至關重要。目前市面上存在較多以假亂真的FBS產(chǎn)品,科研工作者對血清的真實產(chǎn)地、來源難以鑒別。對此,國際血清行業(yè)協(xié)會(ISIA)實施了供應鏈可追溯性的行業(yè)標準,以確保FBS的質(zhì)量和安全性。例如,F(xiàn)BS供應商是否保留原產(chǎn)地的可追溯記錄?是否持有血清生產(chǎn)各階段處理、運輸和商業(yè)交易的文件?這些都是判斷FBS可追溯性需要考慮的因素。
2、產(chǎn)品檢測
每款FBS在生產(chǎn)上市之前,必須經(jīng)過嚴格的質(zhì)控檢測。
質(zhì)控環(huán)節(jié)不可少,以確保上市的血清符合規(guī)定合乎規(guī)格,而血清產(chǎn)品分析證書(COA)就是FBS質(zhì)控的重要體現(xiàn)。在COA中,常規(guī)的檢測指標包括內(nèi)毒素、總蛋白、細菌、病毒等,例如我國藥典規(guī)定,F(xiàn)BS中內(nèi)毒素含量應≤10EU/mL,另外總蛋白為30-50mg/mL、血紅蛋白檢測不高于30mg/dL。
3、質(zhì)量驗證
我們使用FBS目的是為了讓細胞更真實、健康地生長。在確保了FBS的來源真實性、安全可靠性后,下一步就要對FBS的質(zhì)量,即培養(yǎng)細胞的效果進行鑒定了,而這也是決定細胞能否養(yǎng)好的關鍵。
在細胞培養(yǎng)過程,質(zhì)量粗糙的FBS可能會導致細胞出現(xiàn)生長速度緩慢、不貼壁、容易老化等現(xiàn)象,從而導致實驗受阻。經(jīng)過質(zhì)量驗證的FBS,則可以十分確定這款FBS對哪些細胞具有良好的培養(yǎng)效果,進而判斷其能否把自己的細胞養(yǎng)好。對于質(zhì)量優(yōu)質(zhì)的FBS,通常采用血清敏感性細胞(如干細胞)來進行培養(yǎng)驗證,若培養(yǎng)效果良好,則其他常規(guī)細胞系的培養(yǎng)就更不在話下。
4、穩(wěn)定性
FBS作為其他行業(yè)的副產(chǎn)品,其生產(chǎn)在本質(zhì)上會受到天氣、食物供應、經(jīng)濟條件和牛群規(guī)模及疫情等各種因素的影響,導致血清的供應可能出現(xiàn)貨源、價格及批次間的不穩(wěn)定性,從而造成實驗的不順甚至實驗失敗。在過去,國內(nèi)外已有多個實驗室出現(xiàn)過因血清批間差異大而導致實驗結(jié)果無法重復的情況,浪費了巨大的時間和金錢成本。
因此,找到穩(wěn)定提供同批次FBS的供應商,對于確保自己細胞實驗結(jié)果的真實性和可重復性具有重要意義,而且花在重復實驗或檢驗新批次上的時間將大大減少。
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