亚洲中文久久精品无码WW16,亚洲国产精品久久久久爰色欲,人人妻人人澡人人爽欧美一区九九,亚洲码欧美码一区二区三区

產品推薦:氣相|液相|光譜|質譜|電化學|元素分析|水分測定儀|樣品前處理|試驗機|培養箱


化工儀器網>技術中心>操作使用>正文

歡迎聯系我

有什么可以幫您? 在線咨詢

柱式血液DNAout使用說明

來源:優利科(上海)生命科學有限公司   2022年05月13日 16:24  

1.在 0.02-1 mL 新鮮或抗凝血液(冷凍血需先 37℃水浴融化)中加入 0.5 mL紅細胞裂解液(A 型),吹打混勻。

注意:溶液 A 非常容易長菌,取用需要在無菌條件下進行。 

    a) 哺乳動物,血液使用量以 300 uL 以下為宜,使用量越大產量越高,但產率會降低。如果血液多于 300 uL,重復 1-2 步兩次可以提高產率。

    b) 禽類動物,血液使用量以 20 uL 以下為宜,可以從第 3 步做起。 

2. 室溫 12,000-15,000 rpm 離心 5 分鐘,沉淀呈粉紅色,小心傾去上清。 

3. 再短暫離心半分鐘,吸棄殘留的液體。此步有利于后面的細胞裂解,但一般可以省略。

4. 向有沉淀的離心管內加入 0.5 mL 溶液 A(溶液 A 有少量晶體沉淀,用前需要搖晃均勻),用移液槍吹打使沉淀充分懸浮起來。此步目的是裂解細胞,釋放 DNA,所以吹打越充分越好。

5. 靜置 2 分鐘待溶液變清亮后,將液體轉移到離心吸附柱中并靜置 2-5 分鐘,以使 DNA 與膜充分結合。 

6. 12,000 rpm 離心半分鐘,DNA 將吸附到膜上,棄收集管中的廢液。 

7. 加入 0.7 mL 的通用洗柱液,12,000 rpm 離心半分鐘,棄收集管中的廢液。 

8. 加入 0.3 mL 的通用洗柱液,12,000 rpm 離心半分鐘,棄收集管中的廢液。

9. 12,000 rpm 離心半分鐘,甩干殘留液體。此步很重要,以去除膜上殘留通用洗柱液,否則會影響后續反應。

10.將離心吸附柱置于一新的 1.5 mL 塑料離心管(自備)中,加入適量 30-100uLDNA 洗脫液 2.0,室溫放置 2 分鐘。如果將 DNA 洗脫液 2.0 在 65℃預熱后再使用,洗脫 DNA 的效果會更好。 

11. 12,000 rpm 離心半分鐘,離心管底溶液即 DNA 溶液。可以立即使用或放冰箱長期保存。

免責聲明

  • 凡本網注明“來源:化工儀器網”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品,未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的,應在授權范圍內使用,并注明“來源:化工儀器網”。違反上述聲明者,本網將追究其相關法律責任。
  • 本網轉載并注明自其他來源(非化工儀器網)的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時,必須保留本網注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
  • 如涉及作品內容、版權等問題,請在作品發表之日起一周內與本網聯系,否則視為放棄相關權利。
企業未開通此功能
詳詢客服 : 0571-87858618