UHPLC是一種專門的色譜方法,與 HPLC 相比,它運行速度更快、分辨率更好并且使用的溶劑更少。UHPLC 通過使用填充較小顆粒(通常直徑小于 2 µm)的較小色譜柱來實現這一點。生物化學、細胞和分子生物學、臨床醫學和許多其他領域的研究人員依靠 UHPLC 從混合物中分離不同類型的分子——無論這些分子是蛋白質、肽、代謝物、藥物化合物還是其他化學物質。
盡管 UHPLC 的性能明顯更好,但它并不總是*。在您考慮改用 UHPLC 時,恒譜生將幫助您區分重要和不重要的內容。
一、為什么選擇 UHPLC?
盡管 UHPLC 和 HPLC 在各種情況下都有優勢,但如果您在五分鐘內分離兩種組分并且每天只進行幾次分析,則不太可能需要 UHPLC,因為 HPLC 的分離度既足夠又相對快速。
即使您不需要更高的分離能力,UHPLC 仍然可以提高您的通量。與 HPLC 色譜柱相比,uhplc更高的色譜分離度可用于提高復雜樣品的分離能力,或通過使用更短的色譜柱并保持分離度來提高分析速度。
二、然而,UHPLC 并非*。由于 UHPLC 在色譜柱中使用較小的顆粒,因此不適用于臟污或未過濾的樣品。使用未過濾的樣品可能會導致色譜柱堵塞。可以使用恒譜生在線過濾器或者保護柱安裝在柱前進行過濾,避免色譜柱堵塞。通常,UHPLC 需要更高的樣品和流動相清潔度,這會增加溶劑和樣品制備的額外開銷。
三、選擇 UHPLC 的注意事項
因為 UHPLC 在色譜柱內使用較小的顆粒,例如,需要更大的力來驅動溶劑和樣品通過色譜柱。因此,UHPLC 需要能夠在比 HPLC 中使用的泵更高的壓力下工作的泵。
另一方面,雖然 UHPLC 系統的初始成本通常高于其對應的 HPLC 系統,但總體擁有成本實際上可能更低。與 HPLC 系統相比,UHPLC 系統可以用更少的試劑產生更快的結果,并且增加的通量可以提高生產力。在這種情況下,UHPLC 系統較高的初始成本實際上可能會在幾年內節省實驗室資金。
四、未來發展
盡管存在差異,但新型柱填料開始模糊 HPLC 和 UHPLC 之間的界限。例如,對于 HPLC 和 UHPLC,新的“核殼”或“多孔”顆粒提供比傳統柱顆粒更好的性能。核殼顆粒具有更大的表面積,這意味著它們在較低的工作壓力下優于傳統的顆粒表親。這意味著使用核殼顆粒(例如來自恒譜生的核殼顆粒填料,批次穩定性一致,可重復利用),現在可以使用 HPLC 的較低壓力實現 UHPLC 的“超”效率。
對于 HPLC 和 UHPLC,平衡設備成本和性能變得更加靈活。無論您需要簡單的高通量分離還是更高的分離能力,UHPLC 都在不斷發展以滿足比以往更多類型的需求
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