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MALDI-TOF-MS在聚糖(甘氨酸)提取、分離和分析中的應用

來源:加拿大歐羅拉生物科技有限公司   2022年02月24日 15:32  

基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜(matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry),MALDI是軟電離的原理,一般用來分析生物大分子,比如細 菌、病毒、蛋白質、DNA、糖化血紅蛋白等,也可以用來做病理切片的質譜成像。


糖基化是向蛋白質和其他生物分子中添加碳水化合物分子的過程,是在生命系統中發現的z常見的翻譯后修飾之一。據一些估計,人體中發現的蛋白質中有50%以上是通過糖基化修飾的。存在許多糖基化途徑,因為它們的多樣性不jin 限于糖的身份;它們的連接鍵(O或N連接的聚糖),鏈長(多糖鍵的長短)和聚糖鏈的支鏈也可能不同。糖基化分子在細胞識別中起著至關重要的作用,因為細胞用來彼此區分的是細胞表面的聚糖。由于某些遺傳性疾病,獲得性(非遺傳性)疾病和癌癥具有特定的細胞表面聚糖譜,因此可以利用它來確定單個細胞和整個生物的健康狀況。準確鑒定,分類和檢測這些聚糖可以改 善診斷,并指導從業人員為其患者尋求z有效的療法。


在進行MALDI-TOF-MS分析之前,需要從與之共價鍵合的蛋白質上切除聚糖成分。 從母體蛋白中提取聚糖的化學和酶促途徑均存在。 這些提取完成后,即可使用固相提取(SPE)進行聚糖本身的分離。 在這種情況下,例如,固相吸附劑將選擇性地結合在中性條件下存在于溶液中的聚糖,但會在酸性條件下釋放它們,從而使聚糖從本體溶液中分離出來。 分離后,分析物可能必須溶解在與質譜兼容的替代溶劑中,這需要干燥步驟。 對于MALDI電鍍,需要將基質和分析物混合物小心地添加到MALDI板上,這些添加的順序和時間在所得質譜圖的質量中起著重要作用。


完成MALDI-TOF-MS的步驟都需要人工干預,并且可能非常耗時。對于MALDI點樣,樣品的鍍層是一項微妙而費力的工作,需要跟蹤板上的分析物和基質混合物。由于這些原因,許多實驗室都轉向自動化液體處理工作站,以自動化其樣品制備來進行質譜分析。這些系統增加了工作流程和通量,提高了整體實驗室效率和樣品周轉時間。如果您想進一步了解這些液體處理工作站如何簡化您的流程,請與我們的Aurora團隊聯系。


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