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滲透壓儀
1.單位mOsmol/Kg、Osmol/Kg、mmol/L、mmHg、g/mol、道爾頓之間的關(guān)系?
答:滲透壓單位mOsmol/Kg、Osmol/Kg、mmHg
1Osmol/Kg=1000mOsmol/Kg
毫米汞柱(mmHg)是直接用水銀柱高度的毫米數(shù)表示壓強、壓力值的單位,毫米與毫巴間可以進行換算。原理是以汞柱所產(chǎn)生的靜壓力來平衡大氣壓力P,因而汞柱的高度就可以度量大氣壓力的大小。在實驗室,通常用毫米汞柱(mmHg)作為大氣壓力的單位。
標(biāo)準(zhǔn)大氣壓(1.013X10^5Pa)內(nèi)可以這樣換算:P=1.013X10^5Pa=760mm·Hg或100帕=1毫巴≈3/4毫米水銀柱高,精確轉(zhuǎn)換是1mmHg=101325/760Pa。
滲透壓單位:用1升中所含的非電解質(zhì)或電解質(zhì)的毫摩爾表示,稱為毫滲透摩爾,簡稱毫滲。
物質(zhì)的量的濃度:溶質(zhì)的物質(zhì)的量濃度是指單位體積溶液中所含溶質(zhì)的物質(zhì)的量,用符號C表示,常用單位為mol/L,1mol/L=1000mmol/L。
摩爾質(zhì)量:g/mol:單位物質(zhì)的量的物質(zhì)所具有的質(zhì)量(1mol物質(zhì)的質(zhì)量)即1mol該物質(zhì)所具有的質(zhì)量與摩爾質(zhì)量的數(shù)值等同.(物質(zhì)的摩爾質(zhì)量和該物質(zhì)的分子量數(shù)值等同)
物質(zhì)的量(n)、質(zhì)量(m)、摩爾質(zhì)量(M)之間的關(guān)系為:n=m/M
道爾頓:是分子量常用單位,就是將分子中所有原子按個數(shù)求原子量的代數(shù)和。
分子的摩爾質(zhì)量(M)與分子的相對質(zhì)量(Mr)的關(guān)系為:
M=10-3Mrkg×mol-1
2.冰點滲透壓、膠體滲透壓、膜滲透壓、漏點滲透壓之間的區(qū)別?
冰點滲透壓:根據(jù)拉烏爾冰點原理,以溶液冰點下降值與溶液的摩爾濃度成比例關(guān)系為基礎(chǔ),采用高靈敏的感溫元件—熱敏電阻測量不同溶液的結(jié)冰點。
露點滲透壓:應(yīng)用沸點升高原理,水蒸氣壓技術(shù),將溶液加熱使之蒸發(fā),來測量樣品滲透壓,是利用熱電偶凝結(jié)溶液樣品被蒸發(fā)而產(chǎn)生的蒸氣感應(yīng)測量。
露點法跟冰點法相比較所具有的
優(yōu)勢:
*不需要改變物質(zhì)的物象形態(tài)
*可以處理冰點法無法處理的多用于臨床和工業(yè)化學(xué)實驗室的半固態(tài)樣品。
*對于樣品中含有懸浮顆粒或粘稠度較大的樣品,可以輕松得出準(zhǔn)確的結(jié)果。
*可以直接測量植物以及動物組織切片的滲透壓。如植物的葉片,動物的腦和腎臟切片。
劣勢:
露點滲透壓儀不能用來檢測乙醇等揮發(fā)性溶液的樣品,尤其是受熱易分解的樣品,而冰點滲透壓儀可以。
膠體滲透壓:是由測量池來測量的,測量池被半透膜分開,下半部與外界隔離,充滿含電解質(zhì)的林格液,上半部與外界相連,里面充滿含膠體的溶液。膜僅允許水和電解質(zhì)通過,兩個溶液的滲透壓不同,溶液能從測量池的下半部滲透到上半部,直到下半池內(nèi)的壓力與膠體摩爾濃度達到平衡。直接測量由液體靜壓的變化引起的壓力。
膜滲透壓:滲透池被一個半透膜分成兩部分。在*密封的下半部,充滿純?nèi)軇惭b了精確的壓力計系統(tǒng)。在半滲透膜的上半測量池,設(shè)計成曲線型通道系統(tǒng),具有大的表面。漏斗和排液系統(tǒng)能用溶劑沖洗和注入測量池。由于溶劑和溶液滲透壓不同,在下半池形成一個真空度代表滲透活性溶解顆粒的濃度。
3.010、030、050、070、090、auto型號之間的區(qū)別,如何選型?(流程圖)
A、測量原理不同
010,030,auto是冰點滲透壓;050膠體滲透壓;070露點滲透壓;090膜滲透壓
B、應(yīng)用不同
030適用于檢測水溶液滲透壓;010是基于030設(shè)計的,適用于測定苯溶液摩爾分子量和水溶液總滲透壓;auto也是基于030設(shè)計的,全自動測量系統(tǒng)可以滿足高通量的樣本測量,每次最多可同時測量20個樣品;050是為醫(yī)藥領(lǐng)域測試膠體的滲透壓,主要是測血漿或血清以及大分子物質(zhì)的滲透壓;070適合測定水溶液的滲透壓和溶解在不同有機溶劑中聚合物平均分子量;090測定溶解在水或有機溶劑中聚合物的平均分子量。
C、測量范圍不同
010:滲透壓:0-3000mOsmol/kg,分子量:40-5000道爾頓
030:滲透壓:0-2500mOsmol/kg
Auto:滲透壓:0-2500mOsmol/kg
050:99.9mmHg,99.9帕斯卡
070:滲透壓:水溶液:0.1-1.5Osmol/kg;有機溶液:0.001-0.03Osmol/kg
分子量:水溶液:50-5,000道爾頓;有機溶液:40-5,000道爾頓
090:分子量:5,000-2,000,000道爾頓
選型流程:
4.二點校準(zhǔn)與三點校準(zhǔn)的區(qū)別,如何選擇第三個校準(zhǔn)點?
答:三點校準(zhǔn)比二點校準(zhǔn)具有更廣的相對直線度公差+/-1%的范圍,更加準(zhǔn)確。
第三個校準(zhǔn)點即CAL2校準(zhǔn)點的確定:與c1相差最小的校準(zhǔn)點之后的所有校準(zhǔn)點。
可能的校準(zhǔn)點如下:
1.Zero:用蒸餾水校準(zhǔn)
2.CAL1:100,200,300,500,700,850,900,1200,1500,1800,2000,2500
3.CAL2:300,500,700,850,900,1200,1500,1800,2000,2500,3000
例如:
CAL1=100mOsmol/kg:CAL2可以是自300mOsmol/kg以上的所有校準(zhǔn)點。
CAL1=200mOsmol/kg:CAL2可以是自500mOsmol/kg以上的所有校準(zhǔn)點。
CAL1=300mOsmol/kg:CAL2可以是自700mOsmol/kg以上的所有校準(zhǔn)點。
CAL1=2000mOsmol/kg:CAL2可以是3000mOsmol/kg校準(zhǔn)點。
5.正確的校準(zhǔn)步驟是什么?
以三點校準(zhǔn)為例,步驟如下:
1)0點
a)按'Zero'鍵。
b)用測試管盛裝50μL的蒸餾水。
c)設(shè)備自動運行校準(zhǔn)測量值。
d)確認(rèn):用蒸餾水再次進行測量。
2)第一次校準(zhǔn)點300mOsmol/kg
a)按'CAL1'鍵。
b)用測試管盛裝50μLGonotec300mOsmol/kg校準(zhǔn)液。
c)設(shè)備自動運行校準(zhǔn)測量值。
d)確認(rèn):用Gonotec300mOsmol/kg校準(zhǔn)液再次進行測量。
3)第二次校準(zhǔn)點850mOsmol/kg
a)按'CAL2'鍵。
b)用測試管盛裝50μLGonotec300mOsmol/kg校準(zhǔn)液。
c)設(shè)備自動運行校準(zhǔn)測量值。
d)確認(rèn):用Gonotec300mOsmol/kg校準(zhǔn)液再次進行測量。
6.多長時間做一次校準(zhǔn)?
當(dāng)測量出現(xiàn)較大誤差時需要校準(zhǔn)儀器,建議可在樣品中增加蒸餾水樣品,當(dāng)儀器的偏差較大時應(yīng)校準(zhǔn)。010在進行摩爾質(zhì)量測定前,必須用已知質(zhì)量摩爾濃度或滲透壓的溶液校準(zhǔn)儀器。
7.取樣時的注意事項有哪些?
取樣體積要符合儀器測量要求,保證樣品中沒有氣泡。
8.樣品量的多少對測量時間和精度有什么影響?
答:一般測量的樣品量在50ul左右(M型除外),樣品量過多會延長測量的時間或者出現(xiàn)無法結(jié)晶的情況,同時測量的準(zhǔn)確性也會有所下降。樣品量過少可能影響冰晶的注入導(dǎo)致無法結(jié)晶,同時對測量的重復(fù)性有所影響(使重復(fù)性降低)。
9.零點校準(zhǔn)時,應(yīng)該選擇什么樣的水?
答:選擇蒸餾水或去離子水。
10.SPONT.CRYST燈亮?xí)r,如何排除故障?(過早結(jié)晶)
答:稀釋樣品。
1)晶種也有可能附著在熱敏電阻探頭上,用水*清洗熱敏電阻探頭,然后用軟棉紙擦干。如果熱敏電阻探頭上表面有劃痕,更換熱敏電阻探頭。
2)不干凈測試管(例如內(nèi)壁有灰塵)也可能導(dǎo)致自動結(jié)晶。重復(fù)使用測試管可能導(dǎo)致測試管塑料破裂,產(chǎn)生液膜(作用類似于晶種),最終會造成過早結(jié)晶。因此建議測試管只使用一次。
a)簡單地加熱樣本液,達到沸點后再冷卻。
b)前種方法不能去除的晶種,過濾去除。
c)稀釋樣本。當(dāng)冷卻的樣品溶液中含低溶性鹽或者含鹽濃度接近飽和,這時就會有鹽晶
形成。稀釋可以幫助去除鹽晶,但可能因此無法得到精確的結(jié)果。
d)用水*清洗熱敏電阻探頭,然后用軟棉紙擦干。
e)如果玻璃球有劃痕,更換熱敏電阻探頭。
f)確保測試管內(nèi)部沒有灰塵。
g)確保測試管內(nèi)部沒有液膜,否則可能導(dǎo)致過早結(jié)晶.測試管僅能使用一次。重復(fù)使用測試管可能導(dǎo)致不重復(fù)性結(jié)果。重復(fù)使用可能導(dǎo)致測試管塑料破裂,產(chǎn)生新液膜,會造成過早結(jié)晶。
11.NO.CRYST燈亮?xí)r,如何排除故障?(無結(jié)晶)
答:沒有結(jié)晶的原因有兩點:
⑴高滲透壓:充分稀釋樣品溶液。但是必須小心解讀稀釋后的結(jié)果,因為滲透壓不一定與稀釋度成比例。
⑵注入冰晶無效:如果在結(jié)晶過程中聲信號已經(jīng)響起,盡管樣品液滲透壓在正常范圍內(nèi),卻沒有結(jié)晶產(chǎn)生,有三種可能原因:
a、傳送冰晶的針移動受阻,機械故障妨礙了針移動。解決方法:卸下電阻探頭。然后將針弄直、復(fù)位,檢查確保機械性能正常。按住設(shè)備后面的MOTOR紐,檢驗針的移動情況。
b、盡管機械性能正常不會妨礙針移動,但不銹鋼針尖上的冰晶無法到達過冷卻樣品溶液中。覆蓋冰的針尖需通過一個小孔才能到達樣品。孔上可能有水滴。水滴可能導(dǎo)致冰晶粘到孔的內(nèi)壁上而融化。解決方法:將帶有配件的巴斯德吸管與一根長管連接,用其吹掉孔上的水滴。建議移開測試管,然后用熱敏電阻探頭下面的紙巾擦掉水滴。隨著時間的推移,孔上積留了少量的樣品殘液。用裝水的噴霧瓶沖洗孔上殘液。清潔過程中,不需關(guān)閉設(shè)備。
c、上冷卻系統(tǒng)沒有冰形成,因為濕度太低或者系統(tǒng)開啟后過早進入工作狀態(tài)。解決方法:系統(tǒng)開啟至少2分鐘后,再開始測量。如果空氣濕度非常低(例如冬天在加熱的房間),打開上冷卻系統(tǒng)的蓋子。必須考慮到一些重要的條件,以確保測量結(jié)果的重復(fù)性。
12.如何確保結(jié)晶針正常工作?
答:首先檢測結(jié)晶針是否在上冷卻系統(tǒng)的凹槽內(nèi),如果發(fā)生錯位請用鑷子等將結(jié)晶針復(fù)位。另外可以按儀器背面“motor”鍵從側(cè)面觀察結(jié)晶針的運行情況。
13.如何安裝打印紙和色帶?打印紙如何選擇?
針對010,030:
更換打印紙:
A)將兩個螺釘擰下,移去樹脂玻璃外罩。
B)輕按打印機的下部,打開放紙區(qū)。
C)取出空的紙卷筒,按"PAPERFEED"鍵,將剩余的打印紙通過出紙口輸出。不可用向后拉紙帶的方式取出剩余的打印紙。
D)插入一卷新打印紙。打開OSMOMAT010和打印機。將打印紙前端剪齊從上端插入出紙口。按"PAPERFEED"鍵,使紙帶突出出紙口約2厘米。要確保卷紙的滾動方向正確。新的紙卷放入紙盒后關(guān)閉打印機。
E)紙帶穿過樹脂玻璃外罩孔縫,然后固定外罩。下一次測量開始前,按COUNTERRESET鍵,打印頁眉。
打印紙選擇:標(biāo)準(zhǔn)寬度:43mm,卷軸直徑:34mmGonotec貨號30.9.1010。保證大小合適即可。
更換色帶:
當(dāng)打印的結(jié)果不再清晰,必須更換色帶墨盒。更換色帶時,OSMOMAT010可打開也可關(guān)閉。
A)更換色帶前,撕下出紙口處突出的紙帶。
B)將兩個螺釘擰下(5圖6),移去樹脂玻璃外罩(6圖6)。
C)輕按色帶盒的右側(cè),取下色帶盒。
D)替換新的色帶盒Gonotec貨號30.9.1020。
E)順時針擰旋鈕,繃緊色帶.
F)將新的色帶盒放入打印機。紙帶的前端置于色帶和盒之間。
G)再擰旋鈕,繃緊色帶。
H)固定樹脂玻璃外罩。
14.如何安裝軟件和連接電腦?
答:
1)選擇有RS232數(shù)據(jù)接口的電腦,將Gonotec的軟件放入電腦驅(qū)動內(nèi)按照磁盤安裝提示完成軟件的安裝。
2)用數(shù)據(jù)線連接儀器和電腦。
3)先啟動電腦中終端軟件,再打開儀器電源開關(guān)。
4)儀器左邊三個LED燈閃爍,儀器進入自檢狀態(tài)。
5)儀器自檢完畢,“sample”燈亮起,可以進入想要的操作。
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