凱氏定氮儀及消化過程中的注意事項
蛋白質是人體細胞中必要的組成部分,因此人類對于食物中蛋白質的攝取是非常重要的,關系到人類的生命活動。那么換句話來說,測定食物中蛋白質的含量,也是尤為必要的一件事情,隨著儀器產品的發展,現在我們在進行蛋白質測定的時候都是采用專業的凱氏定氮儀。經過多次的試驗表明,凱氏定氮儀能夠避開手工方法的缺點,其測定結果符合國際標準,而且測量速度快、穩定,因此是值得推薦的檢測蛋白質含量的設備。
但還需要注意的是蛋白檢測的前處理消化步驟也很關鍵,這就需要用到智能消化爐,所以為了保證測定結果的準確性,在使用定氮儀測定蛋白質含量的時候,有以下幾個方面需要注意:
1.消化時間要掌握好,時間過長會引起氨的損失;消化時間不夠,消化不*也會導致總氮量偏低。一般保險起見,從文火開始消化到420℃保溫,需要2h左右的時間。
2.樣品放入消化管內時,不要沾附頸上,若沾附時可用少量水沖下,以免被檢樣消化不*,結果偏低。
3.硫酸鉀與硫酸用量的比值是消化成功的關鍵,它決定酸的沸點,也決定消化所需的時間。添加硫酸鉀可以提高溫度加快有機物分解,但硫酸鉀量過大,沸點太高,生成的硫酸氫銨就分解放出氨,使氮損失。因此當硫酸過多的被消耗或樣品中脂肪含量過高時,要增加硫酸的量。
4.消化時,若樣品含糖高或含脂較多時,注意控制加熱溫度,可加入少量正辛醇或液體石蠟,或消泡劑減少泡沫產生。
5.消化時若樣品不易消化至澄清透明,可將消化管中溶液冷卻,加入數滴過氧化氫后,再繼續加熱消化至*。
6.定氮儀使用前可先空蒸一段時間,以除去管道內可能殘留的氨,減少誤差。
7.消化時熱源的強度同迅速消化和*氨化關系很大,在整個消化過程中,不要直接用強火,保持和緩的沸騰,以文火慢慢升溫,以免附在壁上的蛋白質在無硫酸存在的情況下,使氮有損失。
8.將消化后的樣品管放入蒸餾室時,為避免蒸餾過程中溶液沸騰時溢出造成氨損失,在將消化管至密封圈時用手輕旋一下消化管,使與密封圈接觸更加密閉。
9.定氮儀加堿管路使用前要用氫氧化鈉溶液沖洗,使用后要及時用蒸餾水反復沖洗,不能長期積有堿液,以免放置后管路堵塞。
對于還是使用凱氏定氮儀的企業而言,以上的注意事項還是很有參考價值的。
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