大家在養細胞的時候，想必大家也一定遇到過細胞狀態差這種情況，但是細胞狀態差，有很多種原因造成？

細胞狀態很差，常常出現的現象是：細胞邊緣不清晰、細胞不飽滿、折光性差、背景比較臟、黑點很多、細胞碎片多（細胞凋亡后的細胞碎片）、單個細胞內有空泡（凋亡）且空泡比較多；如果細胞出現老化，也就是細胞比較扁平、增殖減緩、細胞核體積增大、細胞突觸變多，此時觀察到的細胞狀態也是不正常的。所以，除了考慮血清和細菌污染的問題，細胞老化也不容忽視~

首先，我們要知道什么是細胞老化？

研究表明,衰老細胞的細胞核、細胞質和細胞膜等均有明顯的變化：
①細胞內水分減少,體積變小,新陳代謝速度減慢；
②細胞內酶的活性降低；
③細胞內的色素會積累；
④細胞內呼吸速度減慢,細胞核體積增大,核膜內折,染色質收縮,顏色加深.線粒體數量減少,體積增大；
⑤細胞膜通透性功能改變,使物質運輸功能降低.
形態變化
總體來說老化細胞的各種結構呈退行性變化.衰老細胞的形態變化表現有：
1、核：增大、染色深、核內有包含物
2、染色質：凝聚、固縮、碎裂、溶解
3、質膜：粘度增加、流動性降低
4、細胞質：色素積聚、空泡形成
5、線粒體：數目減少、體積增大
6、高爾基體：碎裂
7、尼氏體：消失
8、包含物：糖原減少、脂肪積聚
9、核膜：內陷
分子水平的變化
1、DNA：從總體上DNA復制與轉錄在細胞衰老時均受抑制,但也有個別基因會異常激活,端粒DNA丟失,線粒體DNA特異性缺失,DNA氧化、斷裂、缺失和交聯,甲基化程度降低.
2、 RNA：mRNA和tRNA含量降低.
3、蛋白質：含成下降,細胞內蛋白質發生糖基化、氨甲酰化、脫氨基等修飾反應,導致蛋白質穩定性、抗原性,可消化性下降,自由基使蛋白質肽斷裂,交聯而變性.氨基酸由左旋變為右旋.
4、 酶分子：活性中心被氧化,金屬離子Ca2+、Zn2+、Mg2+、Fe2+等丟失,酶分子的二級結構,溶解度,等電點發生改變,總的效應是酶失活.
5、脂類：不飽和脂肪酸被氧化,引起膜脂之間或與脂蛋白之間交聯,膜的流動性降低.如下圖：

     圖1 HEK293細胞  

  圖2 MSC細胞

1. 不要等細胞長得太滿才傳代。細胞太密會導致細胞狀態下降，產生細胞接觸性抑制。

2. 細胞不要消化過度。采用胰蛋白酶消化細胞，會造成細胞表面一定程度的細胞損傷。

3. 最重要的是使用優質的血清和培養基：干細胞對培養基中的內毒素非常敏感。除了要留意基礎培養基的內毒素外，也要留意血清的內毒素。如果血清中內毒素≥3EU/ml時，干細胞很容易老化或死亡，導致細胞“亞健康”狀態，導致實驗受到影響。很多使用者，在血清在試用前，就會通過提早審核該批次《檢測報告》，以決定是否入圍進行試用。

4. 在開始養細胞并傳代時，也要特別注意凍存細胞，以保持細胞有種子庫存在，可以有效避免細胞損傷。

因此應挑選內毒素低的優質血清，如進口胎牛血清品牌：Ausgenex。

一、血清信息

中文：Ausgenex胎牛血清 FBS500-S

品牌：Ausgenex

規格：500ml/瓶

貨號：FBS500-S

批號：見瓶身

儲存溫度：-10℃ to -40℃

二、產品描述

本胎牛血清(Fetal Bovine Serum, FBS)是AusgeneX產品(原產品編號為FBS500-S)，產地澳洲。本胎牛血清不僅適用于常規的細胞培養，更適合用于一些要求較高的細胞的培養。

三、Ausgenex胎牛血清的優勢是：