AlphaSureFire細胞激酶檢測試劑盒是由PerkinElmer 所研發出的新型態細胞內磷酸化蛋白質偵測技術。此技術幾乎不具有任何技術門檻，只要會使用Pipetman 就可以進行實驗！流程簡單，從拿到待測檢體開始到取得偵測結果，只要三個步驟就能完成。Alpha SureFire 除了具有無技術門檻以及操作流程簡單的特性之外，還擁有優于Western Blot、ELISA 的偵測靈敏度與偵測區間，不但可減少樣品用量、提高解析度、并且具有量化的數據顯示方式，彌補了傳統Western Blot 與ELISA 的不足之處。

本系列產品亦可適用于細胞內非磷酸化蛋白質的偵測，例如：GAPDH, Akt, Erk, p53, Topo IIa等。

AlphaSureFire細胞激酶檢測試劑盒產品特點：

偵測靈敏度高，細胞可不經任何基因轉染(transfection) 或大量表現(over-expression) 過程，即可直接進行偵測。

適用多種哺乳動物細胞株以及初代細胞(primary cell)。

全均質化(homogeneous) 操作步驟，流程簡單且不需分離或洗滌步驟，可快速完成偵測實驗。

產品種類豐富，涵蓋各種熱門細胞訊息傳遞路徑，如：Akt, JAK/STAT, MAPK, mTOR, NF-kB, TGFb/Smad signaling pathway 等。

AlphaSureFire細胞激酶檢測試劑盒作用原理：

AlphaSureFire細胞激酶檢測試劑盒作用原理類似Sandwich ELISA，以「AlphaSureFire p-Erk」偵測試劑為例，當cell lysates 樣品中含有待測的特定磷酸化蛋白質"p-Erk" 時，帶有Erk 專一性抗體的Donor Bead、與帶有phospho Erk 專一性抗體的Acceptor Bead，就能夠經由抗體與標的蛋白間的專一性結合而靠近，此時以680 nm 雷射光激發Donor Bead，即可藉由能量轉移反應測得Acceptor Bead 所發出的520-620 nm 螢光訊號。

AlphaSureFire細胞激酶檢測試劑盒產品效能：

采用AlphaSureFire偵測平臺可得到量化的實驗結果，讓研究者能夠更清晰地辨識出實驗組(CTL)與對照組(UV)之間的磷酸化蛋白質表現差異程度。

AlphaSureFire可適用在Primary Cell的磷酸化蛋白質偵測。

AlphaSureFire不需over-expression就能直接測得細胞內原始的磷酸化蛋白質含量。以未經刺激活化過的HUVEC細胞作為研究對象，并以不同濃度的U0126抑制劑(MEK inhibitor, Calbiochem)或LY294002抑制劑(PI3K inhibitor, Calbiochem)分別投與HUVEC細胞培養皿中作用，接著以AlphaSureFire phospho-ERK Assay Kit (Cat# PK-TGRES500)來偵測HUVEC細胞內的磷酸化ERK1/2含量。左圖為進行三重復實驗后所得到的實驗結果。結果顯示相較于用來作為對照組的非MAPK pathway抑制劑LY294002 2 (▲)，U0126抑制劑(●)的確可專一性地抑制MEK磷酸化ERK1/2的反應，且其抑制活性IC50: 100 nM與1998年Duncia et al.研究團隊發表于Bioorg Med Chem Lett.期刊的研究結果相似。 

 AlphaSureFire細胞激酶檢測試劑盒可供選購貨號