農殘速測儀檢測原理及操作步驟

【檢測原理】

有機磷或氨基甲酸酯類農藥對乙酰膽堿酯酶的活性具有抑制作用，通過測定該酶的活性被抑制的程度即可知樣品中含有農藥的殘留情況。

計算公式：抑制率(%)=(ΔA0-ΔAt)/ ΔA0×100%

【檢測對象】

糧食、蔬菜、水果、肉、蛋、奶、水產品等

【技術指標】

檢測下限：1% (抑制率)

檢測范圍：0-100% (抑制率)

【生產日期/保質期】

生產日期：見外包裝；保質期：6個月

【試劑配制】

緩沖液：將緩沖液試劑袋中的試劑倒出，溶于500ml純凈水中，溶解、攪拌混勻即可。

②試劑A（膽堿酯酶）：往標注為膽堿酯酶試劑瓶中加入適量緩沖液配成溶液，搖勻后可直接使用（按照瓶簽上規定的用量加緩沖液）。

③試劑B（顯色劑）：往標注顯色劑試劑中加入9ml緩沖液，搖勻即可。

④底物：往標注為底物瓶中加入9ml純凈水，搖勻即可。

【操作步驟】

1.樣品前處理：

(1) ①植株：稱取5g樣品（葉菜剪成寬度為1厘米的菜樣，塊根菜取1厘米左右的表皮樣品）放入三角瓶中，加入10ml緩沖液后，振蕩提取2分鐘；

②茶葉：稱取0.5g茶葉樣品，加入5ml丙酮，振蕩提取5分鐘；取0.2ml上述丙酮溶液，40~50℃水浴蒸干；加入2.5ml緩沖液，振蕩2分鐘；（自備丙酮）

(2) 若浸提液清澈無色或顏色較淺，取上清液待測；

若浸提液混濁，離心，取上清液待測；

若浸提液色素干擾嚴重，可用活性炭脫色，具體方法如下：

將浸提液轉移至另一個三角瓶中，加入0.1~0.5g活性碳(根據顏色深淺調整)，水浴70℃加熱5分鐘，取出趁熱過濾，濾液待測。

[備注]：蔥、蒜、蘿卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中含有對酶有影響的植物次生物質，容易產生假陽性。處理這類樣品時，可采取整株（體）浸提，避免次生物物質干擾。

2.檢測樣品的制備：

(1) 空白對照液:

① 取緩沖液2.5ml，加入1cm比色皿中，再加入試劑B 100ul，混勻，靜置15分鐘（37度恒溫更佳）。

②加入試劑C 100ul；

③搖勻后立即測試。

(2) 檢測樣品液:

①取待測樣品液2.5ml，加入1cm比色皿中，再加入試劑B 100ul，靜置15分鐘（37度恒溫更佳）。

②加入試劑C 100ul；

③搖勻后立即測試。

3、檢測樣品測試：

(1) 空白對照測量：

① 將比色皿放入的通道中；

② 按“對照”鍵，屏幕下方顯示測量時間；

③ 檢測結束后，儀器自動顯示通道檢測空白對照的測試結果△A0。

[備注]：a 顯色時間為3min，空白對照值應≥0.3，當空白對照值在＜0.3時，需重做空白對照，若重復多次的空白對照值＜0.3時，必須更換酶試劑。

(2) 樣品測量：

① 將比色皿放入的通道中；

② 按“樣品”鍵，屏幕下方顯示測量時間；

③ 檢測結束后，儀器自動顯示通道檢測樣品的測試結果△At。

【判斷標準】

(1) 樣品的抑制率在40~50%之間為可疑農殘超標樣品；

(2) 抑制率＞50%為農殘超標樣品，表明被測樣品的農藥殘留毒性可能超過安全的界定標準，建議用氣相色譜等儀器分析法作進一步確認。

【注意事項】

(1)加入底物后，應迅速混勻，立即測試。

(2)所用的檢測液對皮膚均具有不同程度的傷害，使用時請做好防護。不慎沾到皮膚應立即擦干并用大量水沖洗。

(3)檢測試劑請務必在2~4ºC冰箱保存。