色譜柱使用及維護 | |||||||||||||
每天用足夠的時間來平衡色譜柱,您就會在處理問題方面獲得zui大的"補償",而且您的色譜柱的壽命也會變得更長!------ 一定得做! | |||||||||||||
新的色譜柱在使用之前應該在您自己的液相色譜儀上進行性能測試,即使用色譜柱附帶的檢驗報告上測試條件和樣 | |||||||||||||
品來測定該色譜柱的柱效。并且,在以后的使用中,應時常對色譜柱進行測試。 | |||||||||||||
| 卡套柱的安裝(不加預柱) | ||||||||||||
1.將卡套架套入柱芯 | |||||||||||||
2.將兩片夾套片嵌入柱芯的凹槽,使柱芯高于夾套(見左圖) | |||||||||||||
3.將已套到柱芯上的卡套架向上推,直至高過夾套片 | |||||||||||||
4.將卡套帽和卡套架旋在一起,然后用手擰緊 | |||||||||||||
5.然后依同樣的順序連接好柱子的另一端 | |||||||||||||
6.連接到液相色譜儀,PEEK接頭手擰即可;若為不銹鋼接頭應使用扳手 | |||||||||||||
注意:使用卡套柱時,兩端的卡套應時刻連接在柱芯上。不管您是平衡色譜柱或是清 | |||||||||||||
洗,任何時候都不能將卡套取下來,否則會造成填料的流失。 | |||||||||||||
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| 卡套柱的安裝(加預柱) | ||||||||||||
1.將卡套架套入柱芯 | |||||||||||||
2.將兩片夾套片嵌入柱芯的凹槽,使夾套高于柱芯(見左圖) | |||||||||||||
3.將已套到柱芯上的卡套架向上推,直至高過夾套片 | |||||||||||||
4.將"子彈頭"預柱放入卡套片內 | |||||||||||||
5.將卡套帽和卡套架旋在一起,然后用手擰緊 | |||||||||||||
6.然后依同樣的順序連接好柱子的另一端 | |||||||||||||
7.連接到液相色譜儀,PEEK接頭手擰即可;若為不銹鋼接頭應使用扳手 | |||||||||||||
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| 更換色譜柱濾網和玻璃棉過濾片(同時可以修補色譜柱) | ||||||||||||
注意:在取出反相柱芯的濾網和玻璃片之前,應該將色譜柱充分用水和甲醇/乙腈沖 | |||||||||||||
洗,而且修補工具的頭部也應該蘸取少量的甲醇/乙腈,以避免在取出濾網和玻璃棉 | |||||||||||||
濾片時帶出柱子內的填料。 | |||||||||||||
1.將修補工具中的2套入柱芯的頂端 | |||||||||||||
2.將修補工具中的3輕輕地旋入已套著2的柱芯中,并順時針方向旋轉到旋緊 | |||||||||||||
3.一手握柱芯,另一只手輕輕地向外拉3,取出柱芯頂端的濾網 | |||||||||||||
4.用一個小鏟子輕輕地取出濾網下面的玻璃棉以及被污染的填料 | |||||||||||||
5.將新的填料用甲醇潤濕,然后填入挖去的部位,壓平 | |||||||||||||
6.照(左圖)裝上新的玻璃棉濾網,并用修補工具中的4將玻璃棉壓入柱芯頂端 | |||||||||||||
7.柱芯頂端套上2,然后參照(左圖)將濾網放入 | |||||||||||||
8.壓緊,然后取下2,再用4將濾網的邊緣壓平 | |||||||||||||
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平衡色譜柱 | |||||||||||||
反相色譜柱在經過出廠測試后是保存在乙腈/水中的。請一定確保您所使用的流動相和乙腈/水互溶。由于色譜柱在儲存 | |||||||||||||
或運輸過程中可能會干掉,因此在用流動相分析樣品之前,應使用10-20倍柱體積的甲醇或乙腈平衡色譜柱;如果您所 | |||||||||||||
使用的流動相中含有緩沖鹽,應注意用純水"過渡"。 | |||||||||||||
硅膠柱或極性色譜柱在經過出廠測試后是保存在正庚烷中的。如果該色譜柱需要使用含水的流動相,請在使用流動相 | |||||||||||||
之前用乙醇或異丙醇平衡 | |||||||||||||
如何平衡色譜柱? | |||||||||||||
平衡過程中,將流速緩慢地提高 | |||||||||||||
用流動相平衡色譜柱直到獲得穩定的基線(緩沖鹽或離子對試劑度如果較低,則需要較長的時間來平衡) | |||||||||||||
色譜柱的再生 | |||||||||||||
進行色譜柱再生時,應使用一個謙價的泵,我們建議不使用您的液相色譜儀上的泵。 | |||||||||||||
表1 建議用來沖洗的溶劑體 | |||||||||||||
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請根據下表選擇您的再生方法: | |||||||||||||
極性固定相(如Si,NH2*,DIOL基色譜填料)的再生: | |||||||||||||
正庚烷→氯仿→乙酸乙酯→丙酮→乙醇→水** | |||||||||||||
非極性固定相(如反相色譜填料RP-18,RP-8,CN等)的再生: | |||||||||||||
水→乙腈→氯仿(或異丙醇)→乙腈→水 | |||||||||||||
0.05M稀硫酸可以用來清洗已污染的色譜柱 | |||||||||||||
注意: | |||||||||||||
在對NH2改性的色譜柱進行再生時,由于NH2可能成銨根離子的形式存在,因此應該在水洗后用0.1M的氨水沖洗,然后再 | |||||||||||||
用水沖洗至堿溶液*流出。 | |||||||||||||
**如果簡單的有機溶劑/水的處理不能夠*洗去硅膠表面吸附的雜質,用0.05M稀硫酸沖洗非常有效。 | |||||||||||||
色譜柱的維護 | |||||||||||||
1.使用預柱保護分析柱(硅膠在極性流動相/離子性流動相中有一定的溶解度) | |||||||||||||
2.大多數反相色譜柱的pH穩定范圍是2-7.5,盡量不超過該色譜柱的pH范圍 | |||||||||||||
3.避免流動相組成及極性的劇烈變化 | |||||||||||||
4.流動相使用前必須經脫氣和過濾處理 | |||||||||||||
5.如果使用極性或離子性的緩沖溶液作流動相,應在實驗完畢柱子沖洗干凈,并保存大乙腈中 | |||||||||||||
6.壓力升高是需要更換預柱的信號 |
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