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色譜柱在生物化學(xué)、石油化工、食品工業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生、環(huán)保等領(lǐng)域應(yīng)用很廣。它除了用于定量和定性分析外，還能測(cè)定樣品在固定相上的分配系數(shù)、活度系數(shù)、分子量等。下面就讓我們來了解一下色譜柱吧。
色譜柱結(jié)構(gòu)
在對(duì)色譜柱進(jìn)行分類之前，我們有必要來了解一下，色譜柱的結(jié)構(gòu)是怎么樣的。
色譜柱由、篩板(濾片)、接頭、柱管、壓帽、卡套(密封環(huán))螺絲等組成。柱管多用不銹鋼制成，壓力不高于70kg/cm2時(shí)，也可采用厚壁玻璃或石英管，管內(nèi)壁要求有很高的光潔度。為提高柱效，減小管壁效應(yīng)，不銹鋼柱內(nèi)壁多經(jīng)過拋光。也有人在不銹鋼柱內(nèi)壁涂敷氟塑料以提高內(nèi)壁的光潔度，其效果與拋光相同。還有使用熔融硅或玻璃襯里的，用于細(xì)管柱。色譜柱兩端的柱接頭內(nèi)裝有篩板，是燒結(jié)不銹鋼或鈦合金，孔徑0.2~20μm(5~10&μm)，取決于填料粒度，目的是防止填料漏出。
色譜柱種類
色譜柱的種類根據(jù)方法原理分為了氣相色譜柱、高效液相色譜柱這兩大類，同時(shí)還牽涉到有一些無機(jī)基質(zhì)色譜填料、有機(jī)高分子類型液相色譜填料。下面主要說明一下兩大類的分類特點(diǎn)。
氣相色譜柱
核心是色譜柱，利用的方法是氣相色譜法，亦稱氣體色譜法、氣相層析法。氣相色譜柱主要可分為填充氣相色譜柱和毛細(xì)管氣相色譜柱。氣相色譜柱可按色譜柱的材料、形狀、柱內(nèi)徑的大小和長(zhǎng)度、固定液的化學(xué)性能等進(jìn)行分類。根據(jù)固定液的化學(xué)性能，色譜柱又可分為非極性、極性與手性色譜分離柱等。
高效液相色譜柱
主要發(fā)生在色譜柱中的分離過程，均受熱力學(xué)因素和動(dòng)力學(xué)因素的控制。與所有其他色譜方法一樣，色譜柱是進(jìn)行液相色譜分離的核心部位。高效液相色譜柱可以按其分離模式，也可以按其分離的規(guī)模來進(jìn)行分類。
若按色譜分離模式來分，大致可分為正相、反相、離子交換、疏水作用、體積排除、親和以及手性等類型。依據(jù)相間的相對(duì)極性，可以將液相色譜分為正相和應(yīng)相色譜。當(dāng)固定相極性大于流動(dòng)相極性時(shí)，稱之為“正相”色譜；反之，當(dāng)固定相極性小于流動(dòng)相極性時(shí)，則稱之為“反相”色譜。
按照分離的規(guī)模及柱子的幾何參數(shù)，高效液相色譜柱可以分為制備柱、分析柱和微型柱三種類型，尺寸規(guī)格也不同：①常規(guī)分析柱(常量柱)，內(nèi)徑2~5mm(常用4.6mm，國(guó)內(nèi)有4mm和5mm)，柱長(zhǎng)10~30cm；②窄徑柱(narrowbore，又稱細(xì)管徑柱、半微柱semi-microcolumn)，內(nèi)徑1~2mm，柱長(zhǎng)10~20cm；③毛細(xì)管柱(又稱微柱microcolumn)，內(nèi)徑0.2~0.5mm；④半制備柱，內(nèi)徑>5mm；⑤實(shí)驗(yàn)室制備柱，內(nèi)徑20~40mm，柱長(zhǎng)10~30cm；⑥生產(chǎn)制備柱內(nèi)徑可達(dá)幾十厘米。柱內(nèi)徑一般是根據(jù)柱長(zhǎng)、填料粒徑和折合流速來確定，目的是為了避免管壁效應(yīng)
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