（一）工作原理

    溶液中的物質(zhì)在光的照射激發(fā)下，產(chǎn)生對光吸收的效應(yīng)，這種吸收是具有選擇性的。各種不同的物質(zhì)都有各自的吸收光譜，因此當(dāng)某單色光通過溶液時，其能量就會被吸收而減弱，光能量減弱的程度和物質(zhì)的濃度有一定的比例關(guān)系，即符合朗伯-比爾定律。

                           T = I/I₀

                           LogI₀/I = KCL

                           A = KCL

    其中： T   透射比            I₀   入射光強度

            I    透射光強度         A   吸光度

            K    吸收系數(shù)          L    溶液的光程長

            C    溶液的濃度

從以上公式可以看出，當(dāng)入射光、吸收系數(shù)和溶液的光程長不變時，透過光是根據(jù)溶液的濃度而變化的，722型光柵分光光度計的基本原理是根據(jù)上述物理光學(xué)現(xiàn)象而設(shè)計的。

圖3

（二）儀器的結(jié)構(gòu)

722型光柵分光光度計由光源室，單色器、試樣室、光電管暗盒，電子系數(shù)及數(shù)字顯示器等部件組成，其方框圖如下圖所示：

圖4  儀器結(jié)構(gòu)方框圖

（三）儀器的使用

   1．使用儀器前，使用者應(yīng)該首先了解本儀器的結(jié)構(gòu)和工作原理。以及各個操作旋鈕之功能。在未接通電源前，應(yīng)該對儀器的安全性進行檢查，電源線接線應(yīng)牢固。通地要良好，各個調(diào)節(jié)旋鈕的起始位置應(yīng)該正確，然后再接通電源開關(guān)。

   儀器在使用前先檢查一下，放大器暗盒的硅膠干燥筒（在儀器的左側(cè)），如受潮變色，應(yīng)更換干燥的藍(lán)色硅膠或者倒出原硅膠，烘干后再用。

   2．將靈敏度旋鈕調(diào)置“1”檔（放大倍率zui小）。

   3．開啟電源，指示燈亮，選擇開關(guān)置于“T”，波長調(diào)至測試用波長。儀器預(yù)熱20分鐘。

   4．打開試樣室蓋（光門自動關(guān)閉），調(diào)節(jié)“0”旋鈕，使數(shù)字顯示為“00.0”，蓋上試樣室蓋，將比色皿架置與蒸餾水校正位置，使光電管受光，調(diào)節(jié)透過率“100%”旋鈕，使數(shù)字顯示為“100.0”。

   5．如果顯示不到“100.0”，則可適當(dāng)增加微電流放大器的倍率檔數(shù)，但盡可能置低倍率檔使用，這樣儀器將有更高的穩(wěn)定性。但改變倍率后必須按(4)重新校正“0”和“100%”。

   6．預(yù)熱后，按(4)連續(xù)幾次調(diào)整“0”和“100%”，儀器即可進行測定工作。

   7．吸光度A的測量按(4)調(diào)整儀器的“00.0”和“100%”，將選擇開關(guān)置于“A”，調(diào)節(jié)吸光度調(diào)零旋鈕，使得數(shù)字顯示為“.000”，然后將被測樣品移入光路，顯示值即為被測樣品的吸光度值。

   8．濃度C的測量：選擇開關(guān)由“A”旋置“C”，將已標(biāo)定濃度的樣品放入光路，調(diào)節(jié)濃度旋鈕，使得數(shù)字顯示為標(biāo)定值，將被測樣品放入光路，即可讀出被測樣品的濃度值。

   9．如果大幅度改變測試波長時，在調(diào)整“0”和“100%”后稍等片刻，（因光能量變化急劇，光電管受光后響應(yīng)緩慢，需一段光響應(yīng)平衡時間），當(dāng)穩(wěn)定后，重新調(diào)整“0”和“100%”即可工作。

   10．每臺儀器所配套的比色皿，不能與其它儀器上的比色皿單個調(diào)換。