上海雅吉生物科技有限公司專業(yè)經(jīng)驗(yàn)細(xì)胞系和原代細(xì)胞,如何區(qū)分原代和細(xì)胞系呢,這里就和您分析一下:
細(xì)胞培養(yǎng)物來(lái)源于原代外植體或分散的細(xì)胞懸液。通常在這樣的培養(yǎng)物中細(xì)胞增殖形成匯合地單層細(xì)胞或密集地細(xì)胞懸液。根據(jù)傳統(tǒng)定義,一次收獲和接種的細(xì)胞被稱為原代細(xì)胞[Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells. A Manual of Basic Technique. (New York, Alan R. Liss, Inc.)]. 這類細(xì)胞生命周期有限,在有限的生命周期內(nèi)需掌握好細(xì)胞大的生長(zhǎng)空間,以保持細(xì)胞群中基因型和表型的一致性。
細(xì)胞系是不斷生長(zhǎng),分化的細(xì)胞群,因其經(jīng)過(guò)遺傳改造,致使其具有無(wú)限增長(zhǎng)的潛能。體外生長(zhǎng)的細(xì)胞系用于醫(yī)療或科研。實(shí)際上,連續(xù)細(xì)胞系可以用大量次培養(yǎng)基培養(yǎng),隨著代數(shù)的增加細(xì)胞的基因型和表型都有可能發(fā)生改變。
需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語(yǔ)的定義會(huì)有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過(guò)了遺傳改造。
二、倍增和代數(shù)有什么區(qū)別?
倍增是培養(yǎng)物中細(xì)胞總數(shù)加倍,通常是指細(xì)胞指數(shù)或?qū)?shù)生長(zhǎng)期。代數(shù)是指細(xì)胞群從培養(yǎng)瓶中移出,傳代培養(yǎng)過(guò)程的次數(shù),傳代培養(yǎng)的目的是使細(xì)胞處于低密度以刺激其進(jìn)一步生長(zhǎng)。
三、接收到的凍存細(xì)胞該如何處理?
收到包裝箱后,立即將凍存細(xì)胞從干冰移入液氮中凍存。此過(guò)程盡量快以避免升溫。不要將細(xì)胞儲(chǔ)存在-80℃,這樣會(huì)對(duì)細(xì)胞造成不可挽回的傷害。
四、有多少經(jīng)驗(yàn)才能開始正常人類細(xì)胞培養(yǎng)?
推薦有經(jīng)驗(yàn)者在無(wú)菌環(huán)境下用層流凈化罩工作,如果有經(jīng)驗(yàn)的話對(duì)其它細(xì)胞類型也是很有利的。如果你是細(xì)胞培養(yǎng)的初學(xué)者或打算建立細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室,我們會(huì)為你提供幫助。請(qǐng)聯(lián)系我們的細(xì)胞培養(yǎng)專家。
五、凍存的細(xì)胞該如何開始培養(yǎng)?
(1) 將一管細(xì)胞從液氮罐中取出,注意保護(hù)手和眼睛。
(2) 用10秒鐘時(shí)間將小管的蓋子擰松1/4以去除殘留在螺紋處的液氮,然后將蓋子蓋緊。
(3) 將小管放入37℃水浴中,輕輕握住并旋轉(zhuǎn),直到管內(nèi)物體*融化。
(4) 將小管立即從水浴中拿出,擦干,轉(zhuǎn)入無(wú)菌環(huán)境。
(5) 用70%的酒精沖洗小管,然后擦去多余酒精。
(6) 打開蓋子,注意手指不要碰到里面的螺紋。用1ml離心管離心內(nèi)容物。
(7)平衡管內(nèi)物,用多聚賴氨酸包被培養(yǎng)瓶(多數(shù)細(xì)胞用T-75的培養(yǎng)瓶)。多數(shù)細(xì)胞類型推薦接種密度為每平方厘米5000細(xì)胞。
(8) 蓋好蓋子,輕輕搖晃培養(yǎng)瓶以使細(xì)胞分布均勻。若需要?dú)怏w交換可打開蓋子。
(9) 將培養(yǎng)瓶放放培養(yǎng)箱中(37℃,5%CO2,95%空氣)
(10) 植入培養(yǎng)后第6-16小時(shí)更換一次培養(yǎng)基以去除殘留的二甲基亞楓和未貼壁的細(xì)胞。
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