紫外可見分光光度計不穩(wěn)定時檢查的方法有以下幾種:
①電源是否穩(wěn)定 因為光譜儀器的不穩(wěn)定,90%以上是電源引起的。氘燈恒流源(300mA)若波動1%,則發(fā)出的光通量波動6.7%;鎢燈橫壓源(12V)若波動1%,則發(fā)出的光通量波動3. 4%。所以電源的穩(wěn)定性非常重要。紫外可見分光光度計的電源很多,有交流供電電源(即市電電源)、光源電源、光電倍增管直流高壓電源、放大器的工作電源等。每一種電源都會直接影響儀器的穩(wěn)定性。當儀器出現(xiàn)不穩(wěn)定時,應該根據(jù)有關測試方法,認真檢查、測試,保證各電源的指標符合要求。
②試樣是否被光解 由于紫外光照射到樣品上時,有些樣品會發(fā)生光化學反應(光解),使樣品濃度變化,造成測試數(shù)據(jù)的不穩(wěn)定。如酞丁胺、維生素B12等。
③測試波長選擇是否合適 因為不同的波長時,其摩爾吸光系數(shù);£)不同;而不同的摩爾吸光系數(shù)時,;測試靈敏度不同;當選擇的測試波長不是佳波長時,可能會因為信號不同(有時信號太弱),產(chǎn)生波動。所以,要選擇大波長作為測試波長。
④周圍環(huán)境是否有干擾 當儀器不穩(wěn)定時,要認真查看周圍有無電場、磁場的干擾;是否有振動源存在(周圍如果有飛機起飛和降落,也會引起紫外可見分光光度計的不穩(wěn)定)。
⑤溶劑是否揮發(fā) 由于溶劑揮發(fā),會使試樣濃度不斷變化,致使測試結果不穩(wěn)定(數(shù)據(jù)偏高)。這時,一方面要采取保護溶劑不被揮發(fā)的措施,另一方面盡量選擇不揮發(fā)的溶劑。
⑥雜質引起的不穩(wěn)定 由于試樣中有雜質的存在,而有些雜質本身又不穩(wěn)定(容易光解或容易揮發(fā)),所以會使測試結果不穩(wěn)定。有時會出現(xiàn)雜質峰,干擾主要的測試峰。
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