采卵之前，先往收集管中注入5mLPBS+肝素液(5mg/mL)，置恒溫槽中，溫度37℃，將長(zhǎng)針與導(dǎo)管用PBS+肝素液沖洗2遍后準(zhǔn)備采卵。母牛站立保定，操作人員對(duì)牛進(jìn)行直腸檢查，并掏凈直腸內(nèi)的糞便；清洗外陰，并用0.1%新潔爾滅消毒外陰，然后將采卵針的探頭插入到陰道深部，到達(dá)陰道穹窿后，根據(jù)所要穿刺的卵巢左側(cè)還是右側(cè)而把探頭放在穹窿的相應(yīng)一側(cè)。操作人員一手持探頭，另一手在直腸內(nèi)隔著直腸壁將卵巢牽引至貼在探頭端部。

在進(jìn)口牛用B超機(jī)監(jiān)視器上能清楚看到卵巢，然后上下左右翻轉(zhuǎn)卵巢，根據(jù)圖像區(qū)分及確定卵泡數(shù)和黃體，并把卵泡進(jìn)行分級(jí)，卵泡直徑2～5mm為小卵泡，5～10mm為中卵泡，大于10mm的卵泡為大卵泡，然后調(diào)整卵巢和探頭位置，使監(jiān)視器上卵泡位于穿刺引線上之后，推進(jìn)穿刺針，對(duì)卵泡進(jìn)行穿刺。同時(shí)用腳踏開關(guān)控制真空泵抽取卵泡液，真空泵壓力在35～60mm汞柱之間調(diào)整；從監(jiān)視器上可觀察到被抽取卵泡液的卵泡開始縮小，變得不規(guī)則，直到卵泡液被*抽取，卵泡在監(jiān)視器上消失，退出穿刺針，再對(duì)第二個(gè)卵泡進(jìn)行穿刺，抽取卵泡液，直到該卵巢上2mm以上的卵泡均被穿刺后，換另一側(cè)卵巢，同法處理。

然后用PBS+肝素液沖洗采卵針及導(dǎo)管，沖洗液也放入收集管，將采得的卵泡液用胚胎收集濾杯過濾，卵母細(xì)胞在濾杯中，用PBS液反復(fù)沖洗幾遍，將濾杯中的卵母細(xì)胞倒入表面皿中，在體視鏡下進(jìn)行觀察、檢卵。將檢出的符合要求的卵母細(xì)胞放進(jìn)成熟液中，在5%CO2和39℃溫度的培養(yǎng)箱中進(jìn)行成熟培養(yǎng)。