化學(xué)名稱:1-（4-羥基苯基）-2[1-甲基-3-（4-羥基苯基）-丙氨基]-乙醇鹽酸鹽 理化性質(zhì):可溶于水,微溶于丙酮,可溶于乙醇;PH值:6～7,呈中性,熔點:159.8℃;質(zhì)量標準:zui低含量99%（高壓液相法）...

萊克多巴胺檢測方法

1．分析目標化合物
　　萊克多巴胺

2、儀器設(shè)備
　　液相色譜-質(zhì)譜儀（LC-MS）。

3、試劑
　　除下列試劑外，使用附錄2所列試劑。
　　萊克多巴胺：含萊克多巴胺99％以上，熔點為163.9℃～164.6℃。

4．試驗溶液的制備
　　1）肌肉、肝臟、腎臟和其它可食用部分
　　肌肉：盡可能除去脂肪層，攪碎混合均勻后，稱取其5.00g。
　　肝臟、腎臟和其它可食用部分：攪碎混合均勻后，稱取其5.00g。加入20mL乙酸乙酯和1mL4mol／L碳酸鉀溶液，均質(zhì)后，以每分鐘3000轉(zhuǎn)離心分離10分鐘，收集乙酸乙酯層。離心管內(nèi)殘留物中加入20mL乙酸乙酯，振蕩5分鐘后，按上述同樣條件離心分離，合并所得的乙酸乙酯層，40℃以下濃縮，除去乙酸乙酯。 殘留物中加入30mL乙腈溶解，移入分液漏斗中。加入30mL乙腈飽和正己烷，振蕩，棄去正己烷層，重復(fù)操作2次。乙腈層在40℃以下濃縮，除去乙腈。殘留物中加入1.0mL甲醇溶解，此為試驗溶液。
　　2）脂肪
　　盡可能除去肌肉層，攪碎混合均勻后，稱取其5.00g。加入30mL乙腈和30mL乙腈飽和正己烷，均質(zhì)后，以每分鐘3000轉(zhuǎn)離心分離10分鐘，乙腈層移入分液漏斗中。離心管內(nèi)的正己烷層和殘留物中加入30mL乙腈，振蕩5分鐘，按上述同樣條件離心分離。合并所得的乙腈層于前面的分液漏斗中，加入30mL乙腈飽和正己烷。激烈振蕩5分鐘后，靜置，收集乙腈層， 40℃以下濃縮，除去乙腈。殘留物中加入1.0mL甲醇溶解，此為試驗溶液。

5．標準曲線的制作
　　將鹽酸萊克多巴胺標準品配制成0.025～0.5mg（以萊克多巴胺計）/L的甲醇溶液數(shù)點，分別注入GC-MS中，用峰高法或面積法繪制成標準曲線。

6．定量試驗
　　注入試驗溶液于GC-MS中，根據(jù)5的標準曲線求出萊克多巴胺的含量。

7．測定條件
　　LC-MS柱：十八烷基甲硅烷基化硅膠（粒徑2～5μm），內(nèi)徑2.0～6.0mm、100～250 mm的不銹鋼管。
　　 柱溫：40℃。
　　流動相：乙腈：0.05%三氟乙酸（1：4）混合溶液。
　　主離子（ m/z）： ESI+ 302
　　保持時間標準： 4 ～ 6 分鐘

8．定量界
　　0.01 mg/kg

9．注意事項
　　1） 檢測方法概述
　　本方法用乙酸乙酯或乙腈從樣品提取中萊克多巴胺，用乙腈／正己烷分配脫脂后，LC/MS測定和確證。
　　2） 注意點
　　①萊克多巴胺存在4 種光學(xué)異構(gòu)體。由于用柱子分離光學(xué)異構(gòu)體，確認有復(fù)數(shù)峰時，應(yīng)以各峰高或峰面積的和計算。
　　②采用主離子的儀器設(shè)備，因*離子化方法、生成的離子有不同，所以要研究儀器的*條件。對于主離子之外的確證離子，ESI+為284（ m/z）。